| 刘宝芹, 曾伟伟, 王庆, 张乐生, 王英英, 石存斌, 李华, 吴淑勤.草鱼呼肠孤病毒JX-0901株FQ-PCR检测方法的建立及其在定量分析中的应用[J].广东农业科学,2012,39(11):139-143 |
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草鱼呼肠孤病毒JX-0901株FQ-PCR检测方法的建立及其在定量分析中的应用 |
| Development of fluorescent quantitative polymerase chain reaction for detection of crass crap reovirus JX-0901 strain and its application on virus quantitative analysis |
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| DOI：10.3969/j.issn.1004-874X.2012.11.046 |
| 中文关键词: 草鱼呼肠孤病毒, JX-0901株, FQ-PCR, 定量分析 |
| 英文关键词: |
| 基金项目:[国家公益性行业(农业)科研专项, 大宗淡水鱼类产业技术体系] |
| 作者 | 单位 | | 刘宝芹, 曾伟伟, 王庆, 张乐生, 王英英, 石存斌, 李华, 吴淑勤 | 大连海洋大学生命科学与技术学院,辽宁大连116023
中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东广州510380
中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东广州,510380
大连海洋大学生命科学与技术学院,辽宁大连,116023 |
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| 中文摘要: |
| 根据GCRV JX-0901株S7基因保守区设计特异性引物和TaqMan探针,建立了针对GCRV JX-0901株病毒的TaqMan实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并利用FQ-PCR方法对该毒株在不同鱼类细胞中的增殖情况和不同温度条件下的稳定性进行了定量分析.结果显示,建立的FQ-PCR方法的Ct值与标准品在1.0×101～1.0×108拷贝/μL浓度范围呈良好的线性关系,R2高达0.999;该方法有较好的敏感性和特异性,最低模板检出量为10个拷贝,只能特异地检测出GCRV JX-0901,小能检出其他鱼类常见病毒.该毒株能在10种常见鱼类细胞中增殖,其中在L8824细胞中的增殖量最大.含量达到4.1933×107拷贝/μL；此外,该毒株对温度敏感性较弱,病毒在48、56℃条件下放置96h后才失去对CIK细胞感染性,而在4、15、28、37℃条件下放置32d,-20℃条件下储存2年仍具有较高的含量和较强的感染性. |
| 英文摘要: |
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