| 吴明皇, 常藕琴, 石存斌, 吴淑勤.鳜鱼TCRα基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J].广东农业科学,2011,38(6):1-5 |
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鳜鱼TCRα基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 |
| Establishment of a real-time fluorescent quantitative RT-PCR assay for detection of Siniperca chuatsi's TCRα gene |
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| DOI：10.3969/j.issn.1004-874X.2011.06.001 |
| 中文关键词: 鳜鱼:TCRα基因, 实时荧光定量PCR |
| 英文关键词: |
| 基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项 |
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| 中文摘要: |
| 根据GeneBank上鳜鱼TCRα基因序列设计并合成特异性引物,以鳜鱼β-actin基因为内参,采用RT-PCR方法从鳜鱼的胸腺总RNA中扩增得到鳜鱼TCRα和β-ctin基因,将目的片段纯化后克隆到PMD 18-T载体上,测序鉴定.以阳性质粒为标准品,采用SYBR GreenⅡ染料法进行实时荧光定量PCR扩增,构建标准曲线并进行溶解曲线分析.结果表明,鳜鱼TCRα基因的Ct值与标准品稀释度在102～108拷贝/μL范围呈良好的线性关系,产达0.99以上,溶解曲线分析表明产物为特异的单峰. |
| 英文摘要: |
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