| 王晶, 高燕, 李静, 杨松光, 吴克强, 张美.水稻cDNA酵母表达文库的构建及重金属镉胁迫相关基因的初步筛选[J].广东农业科学,2012,39(13):143-145,148 |
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水稻cDNA酵母表达文库的构建及重金属镉胁迫相关基因的初步筛选 |
| Construction of a yeast expression cDNA library and screening heavy metal related-genes in rice |
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| DOI：10.3969/j.issn.1004-874X.2012.13.049 |
| 中文关键词: 水稻, 重金属, Gateway技术, cDNA文库 |
| 英文关键词: |
| 基金项目:中国科学院植物资源保护与可持续利用重点实验室基金 |
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| 中文摘要: |
| 提取经重金属胁迫处理的水稻幼苗总RNA并纯化mRNA,采用SMART技术反转录成cDNA,利用Gateway技术将cDNA构建到入门载体pDONR222后,再经LR反应重组到酵母表达载体pYES2-DEST52 上,获得水稻cDNA表达文库.检测表明,所构建的cDNA文库能达到后续试验要求.使用重金属镉敏感酵母突变株ycf1△进行水稻中重金属镉耐受相关基因筛选,获得多个可以恢复表型的酵母单克隆.提取质粒并测序分析后可知涉及到水通道蛋白、蛋白酶抑制剂以及金属硫蛋白等不同基因,筛选所得基因即为水稻应答重金属镉胁迫的候选基因. |
| 英文摘要: |
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