| 何永吉, 卢晓霞, 梁雅丽, 潘薇薇, 赵峰梅, 赵邑.Pyk2激酶区基因重组杆状病毒表达载体的构建及表达[J].广东农业科学,2012,39(12):151-153,174 |
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Pyk2激酶区基因重组杆状病毒表达载体的构建及表达 |
| Expression and analysis of Pyk2 kinase domain in baculovirus expression system |
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| DOI：10.3969/j.issn.1004-874X.2012.12.048 |
| 中文关键词: Pyk2, 激酶区蛋白, 杆状病毒, 表达 |
| 英文关键词: |
| 基金项目:山西省青年科技研究基金 |
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| 中文摘要: |
| 采用PT-PCR扩增Pyk2-kinase基因,定向克隆至转移载体pFastBac HTB,转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细菌DH1OBac中,转座后利用抗性及蓝白斑筛选阳忭克隆获得重组Bacmid/Pyk2-kinase；提取重组杆粒.PCR法鉴定后转染昆虫细胞Sf9包装重组杆状病毒；利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过间接免疫荧光(1FA)、SDS-PAGE和Western blot检测表达情况.最终获得了重组杆状病毒rBac-Pyk2-kinase,实现了Pyk 2-k inase在Sf9细胞中的重组表达,其相对分子质量为32 ku,1FA、SDS-PAGE和Western blot检测结果与预期一致. |
| 英文摘要: |
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