【研究意义】桔小实蝇的寄生蜂种类据不完全统计约有70余种，前裂长管茧蜂Diachasmimorpha longicaudata（Ashmead） 是 至今用于控制压低桔小实蝇种群数量应用最广泛和最成功的一种。自20世纪30年代以来，该蜂被许多国家和地区陆续交互引进。但是在释放的过程中还存在许多问题，如寄生蜂扩散不理想、短期定殖率不高及田间寄生率较低等突出问题，其中对寄主的适应性是影响寄生蜂成功寄生的重要因素，本试验从抗性寄主对寄生蜂寄生行为的影响角度进行研究。【前人研究进展】1947—1952年夏威夷从菲律宾、马来西亚和印度等地引进32种实蝇天敌昆虫[1]，通过人为增殖释放可以将桔小实蝇种群数量降低95%左右，到1968年，前裂长管茧蜂D.longicaudatus与另外两种寄生蜂Fopis arisanus、F.vandenboschi 在夏威夷定殖下来并维持一定的种群数量[2]。1961年阿根廷于从墨西哥引进该蜂，用于防治柑桔上的地中海实蝇Ceratitis capiata，有效地使地中海实蝇种群数量下降40%，局部地区寄生率高达60%以上[3-4]。我国引进该蜂后，对其室内大量繁殖技术、生物学特性、储藏技术和田间释放技术等方面进行了研究，并取得了初步的成效[5-7]。【本研究切入点】桔小实蝇是一种潜食性害虫，一旦钻入寄主组织内，化学药剂很难达到理想的防治效果，由于农药的不合理使用，桔小实蝇已对多种药剂产生了严重的抗性[8-11]。寄主本身是寄生蜂寄生行为的重要因子，已有研究主要集中在寄主植物（或果实）、寄主本身释放挥发物对寄生蜂选择行为的影响[12-14]，而关于不同农药抗性品系对寄生蜂的影响尚未见报道。本试验以不同抗性品系桔小实蝇为试验靶标，研究了前列长管茧蜂对不同抗性寄主品系的选择趋性、寄生特性及前裂长管茧蜂在不同抗性寄主品系上的幼虫发育历期，以期为该蜂的田间释放奠定理论基础。【拟解决的关键问题】明确前列长管茧蜂对桔小实蝇不同农药及其抗性品系的选择趋性、该蜂对桔小实蝇不同抗性品系的寄生情况及该蜂在桔小实蝇不同抗性品系上的发育历期。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试前裂长管茧蜂：海南省农业科学院植物保护研究所室内饲养的试验种群。寄生蜂的饲养：将即将羽化出蜂的桔小实蝇蛹放入笼子（50 cm×35 cm×35 cm），每笼饲养300头左右的雌蜂，将接蜂盘（高2～3 mm培养皿，上面用孔径0.125 mm的白色滤布，用皮筋封住寄生盘，每盘含有幼虫80头左右）寄生24 h后取出。以10%蜂蜜水作为食物，并提供清水。
寄生蜂的繁殖、寄主饲养和试验均在温度26（±）1 ℃、湿度65%～75%、光照L∶D=14h∶10h的恒温室内进行。
1.2 试验方法
试验设常规品系（RS）以及常规品系中抗敌百虫（MTRS）、常规品系高抗敌百虫（HTRS）、常规品系中抗高效氯氰聚酯（MBCRS）、常规品系高抗高效氯氰聚酯（HBCRS）、常规品系阿维菌素抗性品系（ARS）6个处理。
供试不同抗性水平寄主的获取：敌百虫和高效氯氰菊酯高抗品系为连续经15代选育后获得；敌百虫和高效氯氰菊酯中抗品系为连续经9代选育后获得，抗阿维菌素品系为连续经9代选育后获得。
采用“Y”型嗅觉仪测定前裂长管茧蜂对不同抗性寄主的反应，以自制的玻璃瓶作味源瓶。嗅觉仪的两臂及直管臂均长10.0 cm，内径2.0 cm，两臂夹角75°。嗅觉仪置于前方敞开的不透明的笼子内。“Y”型嗅觉仪两臂分别通过硅胶管与味源瓶相连。在气流进入味源瓶之前，先经过一个活性炭过滤和一个蒸馏水瓶，以净化空气和增加空气湿度。气泵连接在Y型嗅觉仪主臂上，抽气速500 mL/min，测臂的气流量通过气体流量计控制在250 mL/min。生测时，通过指形管，将寄生蜂逐头引入嗅觉仪的直管内，然后观察记载3 min内寄生蜂的行为反应。选择标准如下：当某蜂爬至出口处或超过某臂1/2处并持续1 min以上者，记该蜂对该臂的气味源作出选择。如蜂引入后5 min，仍不做出选择，则结束对该蜂的行为观察，并记为不反应。整个生测过程在26（±1）℃的室内进行。每测定5头，调换嗅觉仪方位1次，用以消除几何位置对寄生蜂行为可能产生的影响。每测定10头，用95%乙醇清洗嗅觉仪并用吹风机吹干、冷却。每个处理共测60头蜂。当更换处理时，用超声波清洗装置，并用95%乙醇清洗、用烘箱烘干。试验于每天9: 00～16: 00进行。
选择性试验：将不同抗性品系桔小实蝇幼虫（三龄幼虫）的接蜂盘同时放入试验笼（80 cm×80 cm×80 cm）内。每个抗性品系接蜂盘中幼虫数量为80头左右，不同品系随机摆放，各品系之间及与试验笼中心的距离基本一致，笼子内放有10%蜂蜜水和清水，为寄生蜂提供营养。然后分别引入产卵高峰期的寄生蜂8头，寄生24 h后，将幼虫移出，分别放入一次性杯子中（杯底铺有细沙），用滤布（孔径0.125 mm）封口。置于温室内，直至蜂羽化，观察并记录寄生蜂的羽化数量。试验设10次重复。
幼虫在不同抗性寄主上的发育历期：将不同抗性品系桔小实蝇幼虫（三龄幼虫）的接蜂盘放入试验笼内，寄生3 h后移出。观察记录前裂长管茧蜂发育历期及其性别，每天早上8: 00、晚上20: 00各观察一次，每种抗性寄主观察记录30头。
1.3 统计分析方法
采用χ2 检验分析前裂长管茧蜂对不同抗药性品系桔小实蝇选择差异显著性。前裂长管茧蜂在不同抗性寄主上的寄生数量及幼虫发育历期数据经SPSS17.0 软件处理General Linear Model模块进行分析，并进行Duncan's 多重比较。
2 结果与分析
2.1 不同抗药性品系桔小实蝇对前裂长管茧蜂选择行为的影响
通过“Y”型嗅觉仪，测定前裂长管茧蜂对不同抗药性品系桔小实蝇的选择趋性，结果见图1。从图1可以看出，与常规品系相比，前裂长管茧蜂对高抗敌百虫、中抗敌百虫、高抗高效氯氰菊酯、中抗高效氯氰菊酯、抗阿维菌素品系的寄主没有显著的选择偏好性。从数量上看，前裂长管茧蜂更趋向于选择常规品系寄主，但是没有达到显著水平。说明不同抗性品种及水平的寄主不影响前裂长管茧蜂寄生选择行为。
图1 前裂长管茧蜂对不同抗药性品系寄主的选择趋性
Fig.1 The selection tropism of D.longicaudata on different insecticide-resistant strain hosts
2.2 前裂长管茧蜂对不同抗性寄主的寄生特性
图2 前裂长管茧蜂在不同抗性寄主的寄生数量
Fig.2 The parasitic number of D.longicaudata on different resistant host strains
将不同抗性品系及常规品系寄主同时提供给前裂长管茧蜂，供其寄生选择，前裂长管茧蜂对各寄主的选择寄生情况见图2。从图2可以看出，前裂长管茧蜂对各抗性寄主的寄生数量各不相同，数量最多的为常规品系，平均为15.2（±0.25）头，最少的为高抗敌百虫品系，平均为13.8（±0.33）头，但不同抗性品系被寄生的数量差异不显著，这也进一步表明，寄主的抗性对前裂长管茧蜂的选择行为没有显著影响，前裂长管茧蜂对不同抗性寄主没有明显的偏好性。
2.3 抗性寄主对前裂长管茧蜂幼虫发育历期的影响
前裂长管茧蜂在不同抗性寄主上的幼虫发育历期表现不同，雌雄虫间也有显著差异（图3）。虽然前裂长管茧蜂雌虫在中抗敌百虫寄主品系上的幼虫发育历期显著长于高抗高效氯氰菊酯寄主品系，但均与常规寄主品系无显著差异。前裂长管茧蜂雄虫幼虫发育历期在中抗敌百虫寄主品系和中抗高效氯氰菊酯寄主品系上最长，分别为16.42（±0.12）d和16.52（±0.17）d，显著长于常规品系和其他测试品系，其他测试品系与常规品系间无显著差异。
图3 前裂长管茧蜂在不同抗性寄主的幼虫发育历期
Fig.3 Larval development duration of D.longicaudata on different resistant strains
A：雌蜂；B：雄蜂A：Female；B：Male
3 讨论
寄主植物释放的化学物质虽然在寄主栖境定位中起重要作用，但是寄主植物只是提供了寄主昆虫存在的可能，寄生蜂要找到寄主昆虫，还必须借助于寄主以及与它们相关的信息化合物来逐步缩小搜索范围，从而成功繁衍后代。寄主幼虫所释放出来的各种化学物质能使寄生蜂精确定位到寄主，这些化学物质广泛存在于幼虫的表皮、蜕皮、丝腺、上颗腺、血淋巴、粪便等[15]。潘洪生等[16]研究棉铃虫Helicoverpa armigera H ǜ bne 1～5龄寄主幼虫释放的挥发性物质对中红侧沟茧蜂Microplitis mediato雌蜂选择性试验结果表明，中红侧沟茧蜂对一龄和二龄棉铃虫幼虫的释放的挥发性物质有显著的趋向性，对3～5龄棉铃虫幼虫释放的挥发物均没有明显的趋向行为反应。Ngi-Song等[17-18]发现稻禾条螟Chilo partellus、沿岸禾螟Chilo orichal cociliellus、非洲大螟Sesamia calamistis等钻蛀性寄主害虫虫体释放的挥发性物质，对螟黄足绒茧蜂Cotesia flavipes和大螟绒茧蜂Cotesia sesamiae选择趋向行为有显著影响，寄生蜂可以通过虫体释放的挥发性物质成功搜索定位到寄主。本试验中，研究了不同桔小实蝇抗药性品系对前裂长管茧蜂选择趋向行为的影响，结果发现，虽然前裂长管茧蜂对选择常规品系寄主选择的数量较多，但是抗性品系与常规品系之间没有达到显著差异。这可能是因为不同抗性品系桔小实蝇释放的信息化合物种类和数量没有改变或改变不大，无法对前裂长管茧蜂的选择行为产生显著影响，这为生产上进一步利用前裂长管茧蜂防治桔小实蝇提供了理论基础。
寄主植物的种类、品种和生长阶段对寄生蜂的选择行为也存在着一定的影响[19]。赵海燕等[20]研究发现当桔小实蝇和瓜实蝇同时存在时，蝇蛹俑小蜂偏好选择桔小实蝇寄生。白蜡吉丁肿腿蜂Sclerodermus pupariae Yang et Yao能够寄生多种天牛和吉丁甲的幼虫，且后代都能正常生长发育[21]。本研究通过非选择试验发现，前裂长管茧蜂对不同抗性品系的桔小实蝇没有寄生差别，这可能是因为抗药性的提高没有改变桔小实蝇本身的营养物质成分，对前裂长管茧蜂后代的生长发育没有影响。
4 结论
前裂长管茧蜂是一种内寄生蜂，从卵期到成虫羽化前均在寄主体内完成，其生长发育所需要的物质主要依靠寄主。本试验结果表明，前裂长管茧蜂在高抗品系上的发育历期显著短于中抗品系和常规品系，在中抗品系和常规品系上差异不显著。这可能是因为随着寄主抗药性的增加，其体内组织、体液和营养物质的成分发生了改变，亦或是寄主不利的环境加速了寄生蜂的生长发育，其表型下的抗逆性机理还有待进一步深入研究。
人为增加害虫天敌种群数量是生物防治中的重要手段之一。人工增殖的天敌昆虫通常是经室内大量扩繁的种群，目前除了少数能用人工饲料饲养的天敌昆虫种类外，多半仍采用自然寄主饲喂天敌昆虫，其寄主多为长期驯化的敏感品系或单一品系。但是田间的实际情况却要复杂的多，不同地区甚至不同地块使用农药的种类和数量不尽相同，其抗性水平也就不同，目前关于人工增殖天敌（寄生蜂）对田间抗性寄主的寄生情况的研究鲜见报道。本研究发现桔小实蝇不同农药品种及不同抗性水平的抗性品系对前裂长管茧蜂的寄生选择无显著影响，但显著影响雄蜂的幼虫发育历期，该结果可为田间科学释放前裂长管茧蜂有效控制桔小实蝇和有效调控寄生蜂生长发育及寄生蜂与寄主的互作提供了理论依据和研究思路。由于物种的特异性，不同寄生蜂间的寄生特性存在差异，其他种类的寄生蜂对其抗性寄主的寄生特性还有待进一步研究。
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