广东农业科学
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广东省大豆种质资源遗传多样性分析及DNA分子身份证构建

  • 李清1
  • ， 罗永坚1,2
  • ， 吴柔贤1
  • ， 贾俊婷1
  • ， 张文虎1
  • ， 宋松泉1
  • ， 刘军1

1. 广东省农业科学院农业生物基因研究中心 / 广东省农作物种质资源保存与利用重点实验室， 广东 广州 510640；2. 湖北民族大学林学园艺学院，湖北 恩施 445000

Analysis on Genetic Diversity and Construction of DNA Molecular Identity Card of Soybean Germplasm Resources in Guangdong Province

  • LI Qing1
  • ， LUO Yongjian1,2
  • ， WU Rouxian1
  • ， JIA Junting1
  • ， ZHANG Wenhu1
  • ， SONG Songquan1
  • ， LIU Jun1

1. Agro-biological Gene Research Center, Guangdong Academy of Agricultural Sciences/ Guangdong Key Laboratory for Crop Germplasm Resources Preservation and Utilization, Guangzhou 510640, China; 2. College of Forestry and Horticulture, Hubei Minzu University, Enshi 445000, China

作者简介:

李清(1989—),女,博士,助理研究员,研究方向为植物学,E-mail:411066120@qq.com

通信作者:

刘军(1969—),男,博士,研究员,研究方向为种子生物学,E-mail:liujun@gdaas.cn

中图分类号:S565.102

文献标志码:A

文章编号:1004-874X(2020)12-0221-08

DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2020.12.023

参考文献 1
石慧，王思明.大豆在中国的历史变迁及其动因探究［J］.农业考古，2019（3）:32-39.SHI H,WANG S M.Research on historical development and motivations of soybeans in China［J］.Agricultural Archaeology,2019（3）
查找原文
参考文献 2
李向华，王克晶．中国野生大豆遗传变异与分化研究进展［J/OL］．植物遗传资源学报，https://doi.org/10.13430/j.cnki.jpgr.20200515003.2020-07-13. LI X H,WANG K J.Research progress of genetic variation and differentiation in Chinese wild soybean（Glycine soja）［J/OL］.Journal of Plant Genetic Resources.https://doi.org/10.13430/j.cnki.jpgr.20200515003.
查找原文
参考文献 3
李明松，吴俐，吕美琴，康蓉蓉，王金线，曾红英.福建省春大豆地方品种遗传多样性分析［J］.福建农业学报，2014,29（6）:524-529. LI M S,WU L,LV M Q,KANG R R,WANG J X,ZENG H Y．Genetic diversity of spring soybean landraces in Fujian［J］.Fujian Journal of Agricultureal Sciences,2014,29（6）
查找原文
参考文献 4
许占友，邱丽娟，常汝镇，李向华，郑翠明，刘立宏，郭蓓.利用SSR标记鉴定大豆种质［J］.中国农业科学，1999（S1）:3-5.DOI:10.3321/j.issn:0578-1752.1999.Z1.008.XU Z Y,QIU L J,CHANG R Z,LI X H,ZHENG C M,LIU L H,GUO B.Using SSR markers to evaluate genetic diversity of soybean in China ［J］.Scientia Agricultura Sinica,1999（S1）
查找原文
参考文献 5
赵艳杰，冯艳芳，黄思思，马莹雪，李嫒嫒，张蝶，邓超，韩瑞玺，唐浩.182 份东北地区受保护大豆品种DNA指纹库的构建及分析［J］.中国种业,2019（11）:43-47. ZHAO Y J,FENG Y F,HUANG S S,MA Y X,LI A A,ZHANG D,DENG C,HAN R X,TANG H.Construction and analysis of DNA fingerprint library of 182 soybean varieties protected in Northeast China［J］.China Seed Industry,2019（11）cnki.1671-895x.20191023.002
查找原文
参考文献 6
唐玉娟，宋恩亮，王梓钰，马启彬，年海.广东夏大豆新品种（系）分子身份证的构建［J］.广东农业科学，2016,43（5）:37-41.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2016.05.008.TANG Y J,SONG E L,WANG Z Y，MA Q B,NIAN H.Establishment of molecular ID of summer soybean varieties（lines）in Guangdong［J］.Guangdong Agricultural Sciences.2016,43（5）
查找原文
参考文献 7
ZHANG S R,LI B,CHEN Y,SHAIBU A S,ZHENG H K,SUN J M.Molecular-assisted distinctness and uniformity testing using SLAFsequencing approach in soybean［J］.Genes,2020,11（2）:175.DOI:10.3390/genes11020175.
查找原文
参考文献 8
王茂辉，钟春燕，罗文龙，聂金泉，郭涛，王慧，陈志强.基于分子标记和高通量测序的基因精细定位［J］.广东农业科学，2018,45（10）:1-8.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.10.001. WANG M H,ZHONG C Y,LUO W L,NIE J Q,GUO T,WANG H,CHEN Z Q.Fine mapping of genes based on molecular markers and high-throughput sequencing［J］.Guangdong Agricultural Sciences,2018,45（10）:1-8.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.10.001.
查找原文
参考文献 9
FANG C,MA Y M,WU S W,LIU Z,WANG Z,YANG R,HU G H,ZHOU Z K,YU H,ZHANG M,PAN L,ZHOU G A,REN H X,DU W G,YAN H R,WANG Y P,HAN D Z,SHEN Y T,LIU S L,LIU T F,ZHANG J X,QIN H,YUAN J,YUAN X H,KONG F J,LIU B H,LI J Y,ZHANG Z W,WANG G D,ZHU B G,TIAN Z X.Genomewide association studies dissect the genetic networks underlying agronomical traits in soybean［J］.Genome Biol,2017,18:161.DOI:10.1186/s13059-017-1289-9.
查找原文
参考文献 10
LIU Y C,DU H L,LI P C,SHEN Y T,PENG H,LIU S L,ZHOU G A,ZHA H K,LIU Z,SHI M,HUANG X H,LI Y,ZHANG M,WANG Z,ZHU B G,HAN B,LIANG C Z,T Z X.Pan-genome of wild and cultivated soybeans［J］.Cell,2020,182（1）:162-176,DOI:10.1016/j.cell.2020.05.023.
查找原文
参考文献 11
王荣繁，杨存义.大豆种子耐储藏的生物学机制研究进展［J］.中国油料作物学报，2020,42（5）:911-919. WANG R F，YANG C Y.Research progresses on biological mechanism of seed storability in soybean［J］.Chinese Journal of Oil Crop Sciences,2020,42（5）:911-919.
查找原文
参考文献 12
黄希.广东大豆地方品种研究初报［J］.广东农业科学，1984（2）:23-25.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.1984.02.007. HUANG X.Preliminary study on local soybean varieties in Guangdong Province［J］.Guangdong Agricultural Sciences.1984（2）:23-25.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.1984.02.007.
查找原文
参考文献 13
赵青松，陈振伦，赵云云，张杰，马启彬，年海，杨存义.广东5个野生大豆居群的遗传多样性分析［J］.西北植物学报，2013,33（9）:1768-1774.DOI:10.3969/j.issn.1004-874X.2016.05.008. ZHAO Q S,CHEN Z L,ZHAO Y Y,ZHANG J,MA Q B,NIAN H,YANG C Y.Genetic diversity of wild soybean populations from Guangdong［J］.Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2013,33（9）:1768-1774.
查找原文
参考文献 14
王大刚，陈圣男，黄志平，吴倩，胡国玉，李杰坤.193 份大豆品系对SMV抗性鉴定与分子标记检测［J］.分子植物育种，2019,17（24）:8138-8151.DOI:10.13271/j.mpb.017.008138.Wang D G,Chen S N,Huang Z P,Wu Q,Hu G Y,Li J K,Identification and molecular detection of Soybeanmosaic virus resistance of 193 soybean lines［J］.Fenzi Zhiwu Yuzhong（Molecular Plant Breeding）,2019,17（24）:8138-8151.
查找原文
参考文献 15
DOYLE J J,DOYLE J L.Isolation of plant DNA from fresh tissue［J］.Focus,1990,12:13-15.
查找原文
参考文献 16
BASAK S,RAMESH A M,KESARI V,PARIDA A,MITRA S,RANGAN L.Genetic diversity and relationship of Hedychium from Northeast India as dissected using PCA analysis and hierarchical clustering［J］.Meta Gene,2014（2）:459-68.DOI:10.1016/j.mgene.2014.05.002.
查找原文
参考文献 17
BOTSTEIN D,WHITE R L,SKOLNICK M,DAVIS R W.Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphism［J］.American Journal of Human Genetics,1980,32（3）:314-331.DOI:10.1016/0165-1161（81）90274-0
查找原文
参考文献 18
李桂花，陈汉才，张艳，黎庭耀.小白菜种质遗传多样性与亲缘关系的SRAP和 SSR 分析［J］.广东农业科学，2017,44（5）:37-45.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2017.05.007. LI G H,CHEN H C,ZHANG Y,LI T Y.Genetic diversity and phylogenetic relationships analysis of Chinese cabbage germplasm resources by SRAP and SSR［J］.Guangdong Agricultural Sciences,2017,44（5）:37-45.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2017.05.007.
查找原文
参考文献 19
白志元，杨玉花，武国平，卫一超，张瑞军.68 个大豆品种（系）遗传多样性分析［J］.中国农业大学学报，2020,25（3）:17-24.DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2020.03.03BAI Z Y,YANG Y H,WU G P,WEI Y C,ZHANG R J.Genetic diversity analysis of 68 soybean varieties［J］.Journal of China Agricultural University,2020,25（3）:17-24.DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2020.03.03
查找原文
参考文献 20
符小发，高强，任海龙.南繁大豆农艺性状与产量的主成分和聚类分析［J］.广东农业科学，2018，45（4）：6-13.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.04.002 FU X F,GAO Q,REN H L.Principal component analysis and cluster analysis of soybean yield and agronomic traits during winter nursing in Hainan Island［J］.Guangdong Agricultural Sciences,2018,45（4）:6-13.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.04.002
查找原文
参考文献 21
LU S J,DONG L D,FANG C,LIU S L,KONG L P,CHENG Q,CHEN L Y,SU T,NAN H Y,ZHANG D,ZHANG L,WANG Z J,YANG Y Q,YU D Y,LIU X L,YANG Q Y,LIN X Y,TANG Y,ZHAO X H,YANG X Q,TIAN C E,XIE Q G,LI X,YUAN X H,TIAN Z X,LIU B H,WELLER J L,KONG F J.Stepwise selection on homeologous PRR genes controlling flowering and maturity during soybean domestication ［J］.Nat Genet,2020,52（4）:428-436.DOI:10.1038/s41588-020-0604-7.
查找原文
参考文献 22
Gong Z Z.Flowering phenology as a core domestication trait in soybean ［J］.Journal of Integrative Plant Biology,2020,62（5）:546-549.DOI:10.1111/jipb.12934.
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目录contents

    摘要

    【目的】对广东省大豆资源进行遗传多样性分析，筛选有效的 SSR 分子标记，以及构建快速鉴定的 DNA 分子身份证。【方法】收集了广东省 19 个市 37 个县市共 96 份大豆种质资源，提取基因组 DNA 后，利用 30 对 SSR 引物进行 PCR 扩增，通过测序检测获得相关多态性结果进行聚类分析以及 DNA 分子身份证构建， 记录相关品种性状并转化为可视化信息。【结果】毛细管电泳检测结果表明，30 对 SSR 引物在 96 份大豆材料之间均具有清晰稳定的多态性片段，共扩增出 273 个多态性等位变异片段，平均每对引物扩增出多态性等位变异片段数 14.29 个；不同引物揭示的多态性信息含量（PIC）的范围为 0.3891~0.9310，平均值为 0.6786，30 对引物可用于区分广东大豆资源。通过聚类分析发现，所收集的大豆样品可以分为 3 个类群，具有遗传多样性。 从 PIC 最高者开始进行引物组合，筛选出 6 对能将 96 份大豆区分开的引物。【结论】基于 6 对 SSR 引物扩增结果，对多态性片段排序，通过数字与英文结合编码，成功构建 96 份大豆资源的 DNA 分子身份证，为广东省大豆种质资源鉴定提供了重要依据。

    Abstract

    The study was conducted to analyze the genetic diversity of soybean resources in Guangdong Province, select effective SSR markers and construct DNA molecular ID for rapid identification.【Method】In this study, 30 pairs of SSR primers were used to amplify the genomic DNA of 96 soybean germplasm resources collected from 37 counties （cities）of 19 municipalities in Guangdong Province. The polymorphic results were obtained by sequencing, and could be used for cluster analysis and DNA molecular ID construction. Related variety traits were recorded and transformed to visual information.【Result】The results of capillary electrophoresis showed that 30 pairs of SSR primers had clear and stable polymorphic fragments among 96 soybean accessions. A total of 273 polymorphic alleles were amplified, and the average number of alleles per primer was 14.29. The range of polymorphism information content（PIC）revealed by different primers ranged from 0.3891 to 0.9310, the average polymorphism was 0.6786. Thirty pairs of primers could be used to distinguish soybean resources in Guangdong Province. Cluster analysis showed that the collected soybean samples could be divided into three groups with genetic diversity. Six pairs of primer combinations were selected according to the value of PIC to distinguish 96 soybean accessions from each other. 【Conclusion】Based on the amplification results of 6 pairs of SSR primers, the polymorphic fragments were sequenced and a set of molecular ID of 96 materials were successfully constructed through combined coding with numbers and English letters, providing an important basis for the identification of soybean resources in Guangdong Province.

  • 【研究意义】大豆起源于中国，栽种历史悠久， 地理分布广泛，兼具粮食作物和经济作物的双重价值，是我国农业生产重要的农业产品[1-2]。因此， 大豆种质资源的遗传多样性分析和种质资源创新利用具有重要意义。【前人研究进展】目前，在大豆种质资源遗传多样性研究中，SSR分子标记技术应用较广泛[3-4]。DNA分子身份证技术以SSR分子标记技术为基础，通过对SSR扩增多态性结果分析并进行数字化编码赋值，得到独一无二的数字编码作为DNA分子身份证，具有准确性高、快速简便的优点，对种质资源的知识产权保护具有重要作用[5]。目前，植物DNA分子身份证已广泛应用于品种保护和种质资源鉴定中。唐玉娟等[6]对34 份广东夏大豆材料进行了SSR检测，并利用5 个SSR引物构建其分子身份证，为广东夏大豆品种的鉴定提供了依据。Zhang等[7]用SSR分子标记对中黄18、中黄68、中黄35、中黄13 和菏豆13 等5 个大豆栽培种进行检测，构建了进化树，并进行了主成分分析，发现中黄18、中黄68、中黄35 之间存在较大差异，而中黄13 与菏豆13 的亲缘性较高。 基于DNA分子身份证的广泛应用和高通量测序的快速发展[8]，田志喜团队[9-10]从2898 份大豆种质中筛选了26 个野生和栽培大豆，进行了遗传多样性分析和泛基因组学研究，构建进化树并挖掘得到与性状相关的重要基因，对育种具有重要意义。 【本研究切入点】光热资源丰富、雨水充足的华南地区是大豆生产最具发展潜力的地区之一[11-12]。广东省大豆品种资源丰富，但目前有关该地区大豆遗传多样性及DNA分子身份证的研究报道不多[6,13-14]，涉及的品种数量太少。此外， 对广东省农家种大豆的品种来源和性状鉴定方面的信息收集相对较少。【拟解决的关键问题】鉴于此，本研究采用30 对SSR分子标记对收集的96 份广东大豆农家种资源进行遗传多样性分析， 初步确定大豆资源的亲缘关系，筛选核心引物并构建DNA分子身份证体系，以期为广东省大豆种质资源遗传评价、资源保护及创新利用提供参考。

  • 1 材料与方法

  • 1.1 试验材料

  • 供试96 份大豆材料为幼苗期叶片，由广东省农业科学院农业生物基因研究中心于全国第三次资源调查活动中从广东省19 个市37 个县市收集得到， 样品采集信息见表1。

  • 1.2 试验方法

  • 1.2.1 DNA提取

  • 选用CTAB法[15] 提取植株DNA，采集幼苗期10 株大豆叶片混合提取DNA并进行电泳检测DNA质量，DNA保存于-20℃。

  • 1.2.2 PCR扩增

  • 大豆引物（表2）来源于Soybase数据库（http://soybase.org/resources/ssr.php）， 以等位变异片段≥ 3，扩增效率高，引物特异性好以及具有多态性为标准进行预筛选，从中得到了30 对SSR引物，所用引物均由阅微基因技术有限公司合成。PCR扩增体系为10 μL，其中10×Buffer 1 μL，2.5 mmol/L dNTP 0.8 μL， Primer Mix（5 μmol/L）， 正、 反SSR引物各0.6 μL，HSTaq（5U/μL）0.1 μL， 模板DNA 1 μL，ddH2O补齐至10 μL。反应程序：95℃ 预变性5 min；95℃变性30 s、60℃退火30 s、 72℃延伸30 s，35 个循环；72℃延伸5 min，4℃ 保存。

  • 1.2.3 PCR产物毛细管电泳检测及数据分析

  • 于96 孔板中每孔加入ROX-500 分子量内标0.5 μL和甲酰胺混合液8.5 μL，混匀后加入1 μL经纯化后的PCR产物，然后使用ABI3730XL测序仪进行毛细管电泳检测。待电泳结束后，利用Genemapper 3.2 软件自动生成每个位点的图谱文件，分析扩增片段峰值，读取扩增片段大小。 根据一个引物一个基因位点， 将不同引物不同资源电泳片段大小录入到EXCEL中， 用DataFormate2.7 软件转化成POPGENE软件所要求的格式后，使用该软件分析计算等位变异片段数（A）、观测杂合度（Ho）、期望杂合度（He）和Shannon信息指数（I）。采用DataFormate2.7 软件对电泳数据进行转化为“0”“1”格式二元矩阵， 使用NTSYS-PC 2.1 软件计算遗传距离矩阵[16]， 使用MEGA7 软件进行聚类分析构建NJ系统树状图，并使用在线软件iTOL（https://itol.embl.de/）优化。

  • 1.2.4 DNA分子身份证构建

  • 大豆种质资源SSR分子身份证的编码，采用数字和字母表示，具体方法如下：根据每对引物扩增片段（等位变异片段）从小到大以阿拉伯数字1~9 标注，9 个以上的等位变异片段，以大写英文字母A~Z标注，若该位点在某个资源中无扩增记为0；每个引物位点占两位，构建成数字与字母相结合的DNA分子身份证。将身份证编码录入条形码生成器（http://www.t-x-m.com/）构建条形码身份证。将大豆的基本信息、形态特征、生长特征、品质数据、DNA身份证编码等文本信息录入二维码生成器（https://cli.im/），生成可供扫描的大豆DNA身份证二维码。

  • 表1 供试大豆资源信息

  • Table1 Information of 96 soybean resources

  • 表2 SSR引物序列

  • Table2 List of 30 SSR primers

  • 2 结果与分析

  • 2.1 SSR标记多态性分析

  • 利用PCR扩增后的产物经荧光毛细管电泳后， 准确获取每对引物在不同材料的DNA片段大小和相应的毛细管电泳图。由表3 可知，采用30 对引物对96 份大豆共扩增出273 个多态性等位变异片段，平均每对引物扩增出14.29 个多态性等位变异片段。其中，引物Sat_258 扩增出的等位变异片段最多（23.0 个）；引物Satt619、Satt256 和Satt703 扩增出的等位变异片段最少（4.0 个）。30 对引物检测到等位变异片段数（Na）共273 个，平均每对引物扩增出多态性等位变异片段9.1 个。Nei’s多样性指数（H）的变化范围为0.4324~0.9348，平均值为0.7133；Shannon信息指数（I）的变化范围为0.8007~2.8763，平均值为1.5893；期望杂合度（He） 的变化范围为0.4345~0.9348，平均值为0.7138； 多态性信息含量（PIC）的范围为0.3891~0.9310， 平均值为0.6786。一般认为，当PIC ＞ 0.50 时可以认为该引物为高度多态性信息引物[17]。因此， 所选的大部分引物为高度多态性信息引物，说明这些引物可用于大豆种质资源的鉴定和研究。

  • 2.2 聚类分析

  • 根据30 对引物在96 个大豆资源的多态性片段信息建立数据矩阵， 由NTSYSpc 2.1e软件用UPGMA的算法计算遗传距离矩阵，然后采用MEGA7 的Neighbour-joining算法构建系统发生树[16]，结果表明，96 份大豆资源可以划分为3 个类群（图1），第一个组类群包含47 份大豆资源， 第二个组类群包含32 份大豆资源，第三个组类群包含17 份大豆资源。结合聚类结果和原产地分析发现，3 个组群同一地理来源的资源并没有完全聚在一起，不同地区来源的资源发生了聚类，这说明收集的96 份广东省农家种大豆具有品种多样性， 各类群品种之间亲缘关系较近，遗传差异较小。

  • 2.3 核心引物的构建

  • 构建DNA分子身份证的最终目的是使用最少的SSR标记引物达到区分所收集的农家种大豆种质资源并赋予其可辨的分子身份证，同时选取的SSR引物需要满足能区分最多大豆种质的原则。存在特异性位点的材料能通过单一的引物即可直接鉴定， 但一般存在于少量的品种中。为了区分尽可能多的材料，通常采用多引物组合，直至将所有材料完全区分开。以30 对引物的PIC指数（表3）为标准； 选用PIC最高的引物开始筛选供试资源，再加入PIC第二高的引物组合；以此类推，直至筛选出可将全部供试大豆种质全部区分的引物组合，结果见表4。通过PIC由高到低组合，发现在30 对SSR引物中用9 对引物即可完全分离96 份大豆。基于最少引物区分最多种质的原则，对9 对引物进行精简化，将分离种质数目较低的Satt197、Satt547、 AZ302047 引物在9 对引物中剔除，发现Sat_258、 Sat_351、Satt540、BE806308、Sat_164、Satt346 共6 对引物组合即可将96 个大豆资源完全区分。

  • 为验证上述6 对引物分离96 份大豆的可行性， 根据这6 对SSR引物的等位变异系数分别为23、 16、11、13、17、8，按照引物组合能区分最多品种数A=N1N2N3… Nn（N1、N2、N3… Nn为每对引物的观测等位变异片段数Na）的理论值计算，结果表明6 对SSR引物组合能够区分最大品种数目的理论值为7156864 个。因此该6 对SSR引物可作为核心引物用于96 份大豆DNA指纹图谱身份证的构建。

  • 2.4 大豆DNA分子身份证编码

  • 采用上述6 对核心引物构建了96 份大豆资源的DNA分子身份证（表5）；进一步将DNA身份证导入条形码生成器，将大豆的资源信息、特征特性、产量表现、栽种措施及DNA身份证编码等文本信息录入二维码生成器，成功构建了96 份广东大豆资源的DNA身份证二维码。图2 为第43 号大豆资源的DNA身份证结果示例。

  • 3 讨论

  • SSR分子标记作为稳定、高效且多态性好的种质资源鉴评方法[18]，有助于分析大豆的亲缘关系与遗传多样性，并被广泛应用于大豆种质资源鉴评研究中[19]。本研究利用30 对扩增效果清晰、稳定的SSR引物检测96 份广东省农家种大豆资源， 结果显示平均等位变异片段数（Na）为9.1 个，平均有效等位变异片段数（Ne）为4.2657 个，Nei’s多样性指数（H）平均值为0.7133，Shannon信息指数（I）平均值为1.5893，期望杂合度（He）平均值为0.7138，多态性信息含量（PIC）平均值为0.6786。根据30 对SSR引物在96 份广东省农家种大豆资源中的多态性结果进行亲缘关系分析发现， 供试大豆资源可以分为3 个类群，这3 个类群并不完全依据地理划分，聚类分析结果并不能用以判定品种的来源地，但该亲缘关系说明所收集的96 份农家种大豆具有资源多样性，达到了广泛收集农家品种的目的，为广东省大豆品种选育积累了丰富的种质资源。 本研究通过对96 份大豆进行遗传多样性和亲缘性分析，以PIC为指标对30 对引物进行筛选， 剔除分离率较低以及相似性过高的引物，得到可区分96 份大豆的6 对核心引物组合：Sat_258、 Sat_351、Satt540、BE806308、Sat_164、Satt346。 第三次全国农作物种质资源普查与收集过程中，我们已经收集了大量的大豆地方品种，为避免后期重复收集，可将这些核心引物应用于种质资源的甄别工作，推进种质资源的鉴评和利用。符小发等[20]通过对大豆品种的产量、成熟期、分枝等农艺性状进行鉴评，利用聚类分析得到了产量相关的主成分因子。孔凡江团队利用基因组学与生物信息学， 发掘了野生大豆开花驯化过程中的关键调控因子Tof11 和Tof12[21-22]。因此，可以对收集到的大豆资源开展SSR分子标记与农艺性状相关研究的同时，结合基因组学、生物信息学等方法，进一步挖掘大豆农艺性状的关键影响因子。同时核心引物也能对广东省农家种大豆进行快速的指纹图谱构建， 对应相关DNA分子身份证信息以及鉴评性状，为广东省农家种大豆资源的保护提供有力支撑。本研究将DNA身份证导入条形码生成器，录入相关资源信息，成功构建数字化的96 份大豆资源DNA身份证。将所得到的数据转化为可视化的信息进行普及，不仅丰富了种质资源信息数据库，也为种质资源的保护和创新利用奠定了重要基础。同时，大豆资源DNA分子身份证的构建也有利于农户的大豆生产相关栽培知识的宣传，对大豆资源的保护与规范化种植具有促进作用。

  • 表3 30 对SSR在96 份大豆的遗传信息统计

  • Table3 Genetic information statistics of 30 SSR pairs in 96 soybean resources

  • 图1 96 份大豆样品基于遗传距离的Neighbour-joining系统发生树

  • Fig.1 Neighbour-joining phylogenetic tree of 96 soybean resources based on genetic distance

  • 表4 有效SSR标记引物组合对大豆资源的区分

  • Table4 Identification of soybean resources by effective SSR marker primer combinations

  • 表5 96 份大豆资源的分子身份证编码

  • Table5 Molecular ID of 96 soybean landraces

  • 图2 第43 号大豆资源DNA身份证条形码和二维码身份证

  • Fig.2 DNA ID barcode and QR code ID of No.43 soybean resources

  • 4 结论

  • 本研究收集了广东省19 个市37 个县市共96 份农家种大豆种质资源，利用30 对SSR引物进行检测获得相关多态性结果，通过聚类分析发现该96 份大豆品种具有资源多样性，并且可以分为3 个类群。对30 对SSR引物进行筛选后得到6 对核心引物，基于该6 对SSR引物的多态性结果构建了供试大豆的DNA分子身份证，进一步记录相关品种性状并转化为可视化信息，为广东省大豆种质资源的保护与鉴评积累了基础，也为大豆品种的推广与利用提供了重要依据。

  • （责任编辑 崔建勋）

  • 刘军，博士，三级研究员，硕士研究生导师，广东省农业科学院农业生物基因研究中心学科带头人，广东省农作物种质资源保存与利用重点实验室负责人，兼任广东省植物生理学会理事。 长期从事作物种子生物学、 种质资源保存与利用研究，先后主持国家自然科学基金、广东省科技攻关项目、广东省自然科学基金项目和中央补助地方科技基础条件专项资金项目等30 余项。以第一作者和通信作者在BMC Plant Biology、Frontiers in Plant Sciences、《植物学报》《中国农业科学》等国内外期刊发表高水平论文30 多篇，编写和参与编写著作3 部；以第一发明人获得授权发明专利10 项；已研发产品4 个。获省市各级科技成果奖励5 项，包括广东省科技进步奖一等奖、广东省农业技术推广奖一等奖、广州市科技进步奖二等奖等。主持完成的“水稻种子寿命与活力控制理论与技术研究应用”成果经专家评价总体达国际先进水平，部分国际领先，该成果已在多家种业应用，取得显著的经济和社会效益。

  • 参考文献

    • [1]

      石慧，王思明.大豆在中国的历史变迁及其动因探究［J］.农业考古，2019（3）:32-39.[百度学术]
      SHI H,WANG S M.Research on historical development and motivations of soybeans in China［J］.Agricultural Archaeology,2019（3）:32-39.[百度学术]

    • [2]

      李向华，王克晶．中国野生大豆遗传变异与分化研究进展［J/OL］．植物遗传资源学报，https://doi.org/10.13430/j.cnki.jpgr.20200515003.2020-07-13.[百度学术]
      LI X H,WANG K J.Research progress of genetic variation and differentiation in Chinese wild soybean（Glycine soja）［J/OL］.Journal of Plant Genetic Resources.https://doi.org/10.13430/j.cnki.jpgr.20200515003.[百度学术]

    • [3]

      李明松，吴俐，吕美琴，康蓉蓉，王金线，曾红英.福建省春大豆地方品种遗传多样性分析［J］.福建农业学报，2014,29（6）:524-529.[百度学术]
      LI M S,WU L,LV M Q,KANG R R,WANG J X,ZENG H Y．Genetic diversity of spring soybean landraces in Fujian［J］.Fujian Journal of Agricultureal Sciences,2014,29（6）:524-529.[百度学术]

    • [4]

      许占友，邱丽娟，常汝镇，李向华，郑翠明，刘立宏，郭蓓.利用SSR标记鉴定大豆种质［J］.中国农业科学，1999（S1）:3-5.DOI:10.3321/j.issn:0578-1752.1999.Z1.008.[百度学术]
      XU Z Y,QIU L J,CHANG R Z,LI X H,ZHENG C M,LIU L H,GUO B.Using SSR markers to evaluate genetic diversity of soybean in China ［J］.Scientia Agricultura Sinica,1999（S1）:3-5. DOI:10. 3321/j. issn:0578-1752. 1999. Z1. 008[百度学术]

    • [5]

      赵艳杰，冯艳芳，黄思思，马莹雪，李嫒嫒，张蝶，邓超，韩瑞玺，唐浩.182 份东北地区受保护大豆品种DNA指纹库的构建及分析［J］.中国种业,2019（11）:43-47.[百度学术]
      ZHAO Y J,FENG Y F,HUANG S S,MA Y X,LI A A,ZHANG D,DENG C,HAN R X,TANG H.Construction and analysis of DNA fingerprint library of 182 soybean varieties protected in Northeast China［J］.China Seed Industry,2019（11））:43-47. DOI: 10. 19462/j.cnki.1671-895x.20191023.002[百度学术]

    • [6]

      唐玉娟，宋恩亮，王梓钰，马启彬，年海.广东夏大豆新品种（系）分子身份证的构建［J］.广东农业科学，2016,43（5）:37-41.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2016.05.008.[百度学术]
      TANG Y J,SONG E L,WANG Z Y，MA Q B,NIAN H.Establishment of molecular ID of summer soybean varieties（lines）in Guangdong［J］.Guangdong Agricultural Sciences.2016,43（5）:37-41. DOI: 10. 16768/j. issn. 1004-874X. 2016. 05. 008. [百度学术]

    • [7]

      ZHANG S R,LI B,CHEN Y,SHAIBU A S,ZHENG H K,SUN J M.Molecular-assisted distinctness and uniformity testing using SLAFsequencing approach in soybean［J］.Genes,2020,11（2）:175.DOI:10.3390/genes11020175.[百度学术]

    • [8]

      王茂辉，钟春燕，罗文龙，聂金泉，郭涛，王慧，陈志强.基于分子标记和高通量测序的基因精细定位［J］.广东农业科学，2018,45（10）:1-8.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.10.001.[百度学术]
      WANG M H,ZHONG C Y,LUO W L,NIE J Q,GUO T,WANG H,CHEN Z Q.Fine mapping of genes based on molecular markers and high-throughput sequencing［J］.Guangdong Agricultural Sciences,2018,45（10）:1-8.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.10.001.[百度学术]

    • [9]

      FANG C,MA Y M,WU S W,LIU Z,WANG Z,YANG R,HU G H,ZHOU Z K,YU H,ZHANG M,PAN L,ZHOU G A,REN H X,DU W G,YAN H R,WANG Y P,HAN D Z,SHEN Y T,LIU S L,LIU T F,ZHANG J X,QIN H,YUAN J,YUAN X H,KONG F J,LIU B H,LI J Y,ZHANG Z W,WANG G D,ZHU B G,TIAN Z X.Genomewide association studies dissect the genetic networks underlying agronomical traits in soybean［J］.Genome Biol,2017,18:161.DOI:10.1186/s13059-017-1289-9.[百度学术]

    • [10]

      LIU Y C,DU H L,LI P C,SHEN Y T,PENG H,LIU S L,ZHOU G A,ZHA H K,LIU Z,SHI M,HUANG X H,LI Y,ZHANG M,WANG Z,ZHU B G,HAN B,LIANG C Z,T Z X.Pan-genome of wild and cultivated soybeans［J］.Cell,2020,182（1）:162-176,DOI:10.1016/j.cell.2020.05.023.[百度学术]

    • [11]

      王荣繁，杨存义.大豆种子耐储藏的生物学机制研究进展［J］.中国油料作物学报，2020,42（5）:911-919.[百度学术]
      WANG R F，YANG C Y.Research progresses on biological mechanism of seed storability in soybean［J］.Chinese Journal of Oil Crop Sciences,2020,42（5）:911-919.[百度学术]

    • [12]

      黄希.广东大豆地方品种研究初报［J］.广东农业科学，1984（2）:23-25.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.1984.02.007.[百度学术]
      HUANG X.Preliminary study on local soybean varieties in Guangdong Province［J］.Guangdong Agricultural Sciences.1984（2）:23-25.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.1984.02.007.[百度学术]

    • [13]

      赵青松，陈振伦，赵云云，张杰，马启彬，年海，杨存义.广东5个野生大豆居群的遗传多样性分析［J］.西北植物学报，2013,33（9）:1768-1774.DOI:10.3969/j.issn.1004-874X.2016.05.008.[百度学术]
      ZHAO Q S,CHEN Z L,ZHAO Y Y,ZHANG J,MA Q B,NIAN H,YANG C Y.Genetic diversity of wild soybean populations from Guangdong［J］.Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2013,33（9）:1768-1774.[百度学术]

    • [14]

      王大刚，陈圣男，黄志平，吴倩，胡国玉，李杰坤.193 份大豆品系对SMV抗性鉴定与分子标记检测［J］.分子植物育种，2019,17（24）:8138-8151.DOI:10.13271/j.mpb.017.008138.[百度学术]
      Wang D G,Chen S N,Huang Z P,Wu Q,Hu G Y,Li J K,Identification and molecular detection of Soybeanmosaic virus resistance of 193 soybean lines［J］.Fenzi Zhiwu Yuzhong（Molecular Plant Breeding）,2019,17（24）:8138-8151.[百度学术]

    • [15]

      DOYLE J J,DOYLE J L.Isolation of plant DNA from fresh tissue［J］.Focus,1990,12:13-15.[百度学术]

    • [16]

      BASAK S,RAMESH A M,KESARI V,PARIDA A,MITRA S,RANGAN L.Genetic diversity and relationship of Hedychium from Northeast India as dissected using PCA analysis and hierarchical clustering［J］.Meta Gene,2014（2）:459-68.DOI:10.1016/j.mgene.2014.05.002.[百度学术]

    • [17]

      BOTSTEIN D,WHITE R L,SKOLNICK M,DAVIS R W.Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphism［J］.American Journal of Human Genetics,1980,32（3）:314-331.DOI:10.1016/0165-1161（81）90274-0[百度学术]

    • [18]

      李桂花，陈汉才，张艳，黎庭耀.小白菜种质遗传多样性与亲缘关系的SRAP和 SSR 分析［J］.广东农业科学，2017,44（5）:37-45.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2017.05.007.[百度学术]
      LI G H,CHEN H C,ZHANG Y,LI T Y.Genetic diversity and phylogenetic relationships analysis of Chinese cabbage germplasm resources by SRAP and SSR［J］.Guangdong Agricultural Sciences,2017,44（5）:37-45.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2017.05.007.[百度学术]

    • [19]

      白志元，杨玉花，武国平，卫一超，张瑞军.68 个大豆品种（系）遗传多样性分析［J］.中国农业大学学报，2020,25（3）:17-24.DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2020.03.03[百度学术]
      BAI Z Y,YANG Y H,WU G P,WEI Y C,ZHANG R J.Genetic diversity analysis of 68 soybean varieties［J］.Journal of China Agricultural University,2020,25（3）:17-24.DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2020.03.03[百度学术]

    • [20]

      符小发，高强，任海龙.南繁大豆农艺性状与产量的主成分和聚类分析［J］.广东农业科学，2018，45（4）：6-13.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.04.002[百度学术]
      FU X F,GAO Q,REN H L.Principal component analysis and cluster analysis of soybean yield and agronomic traits during winter nursing in Hainan Island［J］.Guangdong Agricultural Sciences,2018,45（4）:6-13.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.04.002[百度学术]

    • [21]

      LU S J,DONG L D,FANG C,LIU S L,KONG L P,CHENG Q,CHEN L Y,SU T,NAN H Y,ZHANG D,ZHANG L,WANG Z J,YANG Y Q,YU D Y,LIU X L,YANG Q Y,LIN X Y,TANG Y,ZHAO X H,YANG X Q,TIAN C E,XIE Q G,LI X,YUAN X H,TIAN Z X,LIU B H,WELLER J L,KONG F J.Stepwise selection on homeologous PRR genes controlling flowering and maturity during soybean domestication ［J］.Nat Genet,2020,52（4）:428-436.DOI:10.1038/s41588-020-0604-7.[百度学术]

    • [22]

      Gong Z Z.Flowering phenology as a core domestication trait in soybean ［J］.Journal of Integrative Plant Biology,2020,62（5）:546-549.DOI:10.1111/jipb.12934.[百度学术]

  • 基本信息

    中图分类号: S565.102
    文献标志码: A
    DOI: 10.16768/j.issn.1004-874X.2020.12.023
    文章编号: 1004-874X(2020)12-0221-08

    基金信息

    广东省科技计划项目（2020B121201008，2020B020220008）；
    广东省现代农业产业技术体系创新团 队项目（2019KJ106）；
    广州市科技计划项目（201909020001，201807010114）；

    引用信息

    李清，罗永坚，吴柔贤，贾俊婷，张文虎，宋松泉，刘军 . 广东省大豆种质资源遗传多样性分析及 DNA 分子身份证构建［J］. 广东农业科学，2020，47（12）：221-228.

    稿件历史

    收稿日期: 2020-10-15

  • 参考文献

    • [1]

      石慧，王思明.大豆在中国的历史变迁及其动因探究［J］.农业考古，2019（3）:32-39.[百度学术]
      SHI H,WANG S M.Research on historical development and motivations of soybeans in China［J］.Agricultural Archaeology,2019（3）[百度学术]

    • [2]

      李向华，王克晶．中国野生大豆遗传变异与分化研究进展［J/OL］．植物遗传资源学报，https://doi.org/10.13430/j.cnki.jpgr.20200515003.2020-07-13.[百度学术]
      LI X H,WANG K J.Research progress of genetic variation and differentiation in Chinese wild soybean（Glycine soja）［J/OL］.Journal of Plant Genetic Resources.https://doi.org/10.13430/j.cnki.jpgr.20200515003.[百度学术]

    • [3]

      李明松，吴俐，吕美琴，康蓉蓉，王金线，曾红英.福建省春大豆地方品种遗传多样性分析［J］.福建农业学报，2014,29（6）:524-529.[百度学术]
      LI M S,WU L,LV M Q,KANG R R,WANG J X,ZENG H Y．Genetic diversity of spring soybean landraces in Fujian［J］.Fujian Journal of Agricultureal Sciences,2014,29（6）[百度学术]

    • [4]

      许占友，邱丽娟，常汝镇，李向华，郑翠明，刘立宏，郭蓓.利用SSR标记鉴定大豆种质［J］.中国农业科学，1999（S1）:3-5.DOI:10.3321/j.issn:0578-1752.1999.Z1.008.[百度学术]
      XU Z Y,QIU L J,CHANG R Z,LI X H,ZHENG C M,LIU L H,GUO B.Using SSR markers to evaluate genetic diversity of soybean in China ［J］.Scientia Agricultura Sinica,1999（S1）[百度学术]

    • [5]

      赵艳杰，冯艳芳，黄思思，马莹雪，李嫒嫒，张蝶，邓超，韩瑞玺，唐浩.182 份东北地区受保护大豆品种DNA指纹库的构建及分析［J］.中国种业,2019（11）:43-47.[百度学术]
      ZHAO Y J,FENG Y F,HUANG S S,MA Y X,LI A A,ZHANG D,DENG C,HAN R X,TANG H.Construction and analysis of DNA fingerprint library of 182 soybean varieties protected in Northeast China［J］.China Seed Industry,2019（11）cnki.1671-895x.20191023.002[百度学术]

    • [6]

      唐玉娟，宋恩亮，王梓钰，马启彬，年海.广东夏大豆新品种（系）分子身份证的构建［J］.广东农业科学，2016,43（5）:37-41.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2016.05.008.[百度学术]
      TANG Y J,SONG E L,WANG Z Y，MA Q B,NIAN H.Establishment of molecular ID of summer soybean varieties（lines）in Guangdong［J］.Guangdong Agricultural Sciences.2016,43（5）[百度学术]

    • [7]

      ZHANG S R,LI B,CHEN Y,SHAIBU A S,ZHENG H K,SUN J M.Molecular-assisted distinctness and uniformity testing using SLAFsequencing approach in soybean［J］.Genes,2020,11（2）:175.DOI:10.3390/genes11020175.[百度学术]

    • [8]

      王茂辉，钟春燕，罗文龙，聂金泉，郭涛，王慧，陈志强.基于分子标记和高通量测序的基因精细定位［J］.广东农业科学，2018,45（10）:1-8.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.10.001.[百度学术]
      WANG M H,ZHONG C Y,LUO W L,NIE J Q,GUO T,WANG H,CHEN Z Q.Fine mapping of genes based on molecular markers and high-throughput sequencing［J］.Guangdong Agricultural Sciences,2018,45（10）:1-8.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.10.001.[百度学术]

    • [9]

      FANG C,MA Y M,WU S W,LIU Z,WANG Z,YANG R,HU G H,ZHOU Z K,YU H,ZHANG M,PAN L,ZHOU G A,REN H X,DU W G,YAN H R,WANG Y P,HAN D Z,SHEN Y T,LIU S L,LIU T F,ZHANG J X,QIN H,YUAN J,YUAN X H,KONG F J,LIU B H,LI J Y,ZHANG Z W,WANG G D,ZHU B G,TIAN Z X.Genomewide association studies dissect the genetic networks underlying agronomical traits in soybean［J］.Genome Biol,2017,18:161.DOI:10.1186/s13059-017-1289-9.[百度学术]

    • [10]

      LIU Y C,DU H L,LI P C,SHEN Y T,PENG H,LIU S L,ZHOU G A,ZHA H K,LIU Z,SHI M,HUANG X H,LI Y,ZHANG M,WANG Z,ZHU B G,HAN B,LIANG C Z,T Z X.Pan-genome of wild and cultivated soybeans［J］.Cell,2020,182（1）:162-176,DOI:10.1016/j.cell.2020.05.023.[百度学术]

    • [11]

      王荣繁，杨存义.大豆种子耐储藏的生物学机制研究进展［J］.中国油料作物学报，2020,42（5）:911-919.[百度学术]
      WANG R F，YANG C Y.Research progresses on biological mechanism of seed storability in soybean［J］.Chinese Journal of Oil Crop Sciences,2020,42（5）:911-919.[百度学术]

    • [12]

      黄希.广东大豆地方品种研究初报［J］.广东农业科学，1984（2）:23-25.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.1984.02.007.[百度学术]
      HUANG X.Preliminary study on local soybean varieties in Guangdong Province［J］.Guangdong Agricultural Sciences.1984（2）:23-25.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.1984.02.007.[百度学术]

    • [13]

      赵青松，陈振伦，赵云云，张杰，马启彬，年海，杨存义.广东5个野生大豆居群的遗传多样性分析［J］.西北植物学报，2013,33（9）:1768-1774.DOI:10.3969/j.issn.1004-874X.2016.05.008.[百度学术]
      ZHAO Q S,CHEN Z L,ZHAO Y Y,ZHANG J,MA Q B,NIAN H,YANG C Y.Genetic diversity of wild soybean populations from Guangdong［J］.Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2013,33（9）:1768-1774.[百度学术]

    • [14]

      王大刚，陈圣男，黄志平，吴倩，胡国玉，李杰坤.193 份大豆品系对SMV抗性鉴定与分子标记检测［J］.分子植物育种，2019,17（24）:8138-8151.DOI:10.13271/j.mpb.017.008138.[百度学术]
      Wang D G,Chen S N,Huang Z P,Wu Q,Hu G Y,Li J K,Identification and molecular detection of Soybeanmosaic virus resistance of 193 soybean lines［J］.Fenzi Zhiwu Yuzhong（Molecular Plant Breeding）,2019,17（24）:8138-8151.[百度学术]

    • [15]

      DOYLE J J,DOYLE J L.Isolation of plant DNA from fresh tissue［J］.Focus,1990,12:13-15.[百度学术]

    • [16]

      BASAK S,RAMESH A M,KESARI V,PARIDA A,MITRA S,RANGAN L.Genetic diversity and relationship of Hedychium from Northeast India as dissected using PCA analysis and hierarchical clustering［J］.Meta Gene,2014（2）:459-68.DOI:10.1016/j.mgene.2014.05.002.[百度学术]

    • [17]

      BOTSTEIN D,WHITE R L,SKOLNICK M,DAVIS R W.Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphism［J］.American Journal of Human Genetics,1980,32（3）:314-331.DOI:10.1016/0165-1161（81）90274-0[百度学术]

    • [18]

      李桂花，陈汉才，张艳，黎庭耀.小白菜种质遗传多样性与亲缘关系的SRAP和 SSR 分析［J］.广东农业科学，2017,44（5）:37-45.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2017.05.007.[百度学术]
      LI G H,CHEN H C,ZHANG Y,LI T Y.Genetic diversity and phylogenetic relationships analysis of Chinese cabbage germplasm resources by SRAP and SSR［J］.Guangdong Agricultural Sciences,2017,44（5）:37-45.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2017.05.007.[百度学术]

    • [19]

      白志元，杨玉花，武国平，卫一超，张瑞军.68 个大豆品种（系）遗传多样性分析［J］.中国农业大学学报，2020,25（3）:17-24.DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2020.03.03[百度学术]
      BAI Z Y,YANG Y H,WU G P,WEI Y C,ZHANG R J.Genetic diversity analysis of 68 soybean varieties［J］.Journal of China Agricultural University,2020,25（3）:17-24.DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2020.03.03[百度学术]

    • [20]

      符小发，高强，任海龙.南繁大豆农艺性状与产量的主成分和聚类分析［J］.广东农业科学，2018，45（4）：6-13.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.04.002[百度学术]
      FU X F,GAO Q,REN H L.Principal component analysis and cluster analysis of soybean yield and agronomic traits during winter nursing in Hainan Island［J］.Guangdong Agricultural Sciences,2018,45（4）:6-13.DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2018.04.002[百度学术]

    • [21]

      LU S J,DONG L D,FANG C,LIU S L,KONG L P,CHENG Q,CHEN L Y,SU T,NAN H Y,ZHANG D,ZHANG L,WANG Z J,YANG Y Q,YU D Y,LIU X L,YANG Q Y,LIN X Y,TANG Y,ZHAO X H,YANG X Q,TIAN C E,XIE Q G,LI X,YUAN X H,TIAN Z X,LIU B H,WELLER J L,KONG F J.Stepwise selection on homeologous PRR genes controlling flowering and maturity during soybean domestication ［J］.Nat Genet,2020,52（4）:428-436.DOI:10.1038/s41588-020-0604-7.[百度学术]

    • [22]

      Gong Z Z.Flowering phenology as a core domestication trait in soybean ［J］.Journal of Integrative Plant Biology,2020,62（5）:546-549.DOI:10.1111/jipb.12934.[百度学术]