【研究意义】猕猴桃是一种原产于中国的多年生藤本植物，其果实风味独特，受到广大消费者的青睐^[1]。《2021年中国猕猴桃产业研究报告》指出：我国猕猴桃种植面积超18万hm²，年产量达219万t，均居世界第一，其主产区为陕西、四川、贵州等省份。然而，近年来猕猴桃花腐病发生严重，病原菌对长期施用的常规防治药剂已产生一定抗药性，导致猕猴桃花腐病防治难度加大，极大限制我国猕猴桃产业发展。开展猕猴桃花腐病田间防治研究，筛选安全、高效的药剂，对于高效防治该病害，促进猕猴桃产业的健康发展具有指导意义。【前人研究进展】猕猴桃花腐病又称猕猴桃细菌性花腐病，其病原菌主要为假单胞菌属(Pseudomonas spp.)，包括绿黄假单胞菌(P. viridifl ava)、荧光假单胞菌(P. fl uorescens)及丁香假单胞菌(P. syringae)^[2-4]。病原菌每年4月初开始侵染猕猴桃植株，通过花蕾与萼片进入花器官，发病初期花蕾和萼片上出现黄褐色斑点，清晨时可在感病花蕾上看见水珠状菌脓，如遇低温高湿气候病原菌则迅速蔓延，导致花蕾褐变、坏死、脱落、不可开放，或果实小且畸形，严重降低猕猴桃产量^[5-6]。日常生产中常采用树皮环剥、断根、缩短母枝等农业方法^[7-8]或喷施石硫合剂、铜制剂、叶枯唑等化学药剂对猕猴桃花腐病进行防治^[9-10]。前者会损伤树体，严重影响幼树或弱势树体的生长；后者简单高效，是目前防治猕猴桃花腐病的优选方法之一。但长期使用单一药剂容易导致病原菌产生抗药性，故在防治时可将药剂进行复配，既能延缓抗药性产生，又能提高药效^[11-13]。将安全环保的生物农药与低毒高效的化学农药进行复配后施用，已成为当代农业病害防治的重要途径，涂美艳等^[14]将春雷霉素、戊唑醇、丙森醚菌酯与咪酰胺复配后施用，可将猕猴桃溃疡病病情指数控制至4.67，显著低于对照的17.00；杨丽娜等^[15]将申嗪霉素与吡唑醚菌酯复配后施用，对桃枝枯病的防效达80% 以上；王垚等^[16]将四霉素与噻霉酮复配后施用，对烟草青枯病的防效可达90% 以上。【本研究切入点】贵州猕猴桃花腐病发生严重，利用高效安全的药剂进行防治，符合病虫害防治要求及绿色食品发展需要。2020年，本课题组通过室内药筛试验，发现将四霉素与丙硫唑按有效成分4 ∶ 1复配对猕猴桃花腐病菌具有毒力增效作用，但其对花腐病的田间防效、植株生长情况及花果发育性状的影响尚未探明^[6]，本研究将其与对应单剂、生产上常用药剂及对应复配剂同时进行田间施用，以期为花腐病的防治挖掘新药剂。【拟解决的关键问题】本研究通过开展田间防效试验，明确6种药剂对猕猴桃花腐病的田间防效，并评价其安全性，以期筛选出高效安全的药剂，为猕猴桃产业的健康发展提供科学依据。

1　材料与方法 1.1　试验材料

1.1.1 供试猕猴桃　供试猕猴桃品种为贵长，树龄4年，架型为“T”型，株行距为3.5 m × 3.0 m，种植密度为900株/hm²，供试猕猴桃植株近3年连续发生花腐病。

1.1.2 试验地概况　试验地位于贵州省息烽县猕猴桃种植基地(27°03′15.7″N、106°31′13.9″E)，当地为亚热带季风性气候，土壤为黄棕壤土，平均海拔1 256.0 m，年均温12.5 ℃，年降雨量1 203 mm。喷药防治时间为2021年4月，喷药前后两天均无降雨。试验地块除处理药剂不同外，浇水、施肥、授粉等管护措施均一致。

1.2　试验方法

1.2.1 试验设计　选取长势相同的植株进行试验，共设7个处理。根据推荐使用浓度施用本团队所筛选药剂、生产上常用药剂及其复配剂进行试验^{[6, 10]} (表 1)，分别为0.3% 四霉素500倍液(A)、20% 丙硫唑1 500倍液(B)、6% 春雷霉素1 500倍液(C)、27% 春雷 • 溴菌腈1 000倍液(D)、36% 春雷 • 喹啉铜2000倍液(E)、0.3% 四霉素与20% 丙硫唑按有效成分质量比4 ∶ 1复配后500倍液(F，以下简称四霉素 • 丙硫唑)、清水对照(CK)，所有药剂的施用方式均为现配现用。试验采用随机区组设计(表 2)，每个处理3次重复，共计21个小区，每个小区3株猕猴桃，共计63株猕猴桃。分别于2021年4月14日、4月24日施药，采用容量20 L的背负式电动喷雾器进行喷雾防治，均匀喷雾至药液充分附着在植株表面且刚好不掉落为宜。

1.2.2 调查指标及方法　(1) 发病情况及防效。采用五点取样法定株定点调查发病情况，从每株树东、西、南、北、中五点各选取1根长势一致的枝条挂牌标记，调查并记录总花蕾数及发病花蕾数。于第1次施药前1 d(4月13日)调查发病情况背景值，于第1次施药7 d后(4月21日) 调查第1次防治结果，于第2次施药7d后(5月1日)调查第2次防治结果，对比其发病情况防治前后变化值。调查时段为早晨7：30—10：00，此时菌脓流出便于观察发病情况。根据花蕾发病程度将病害分为5级：0级，花蕾无流脓、褐变等发病症状；1级，花蕾流脓、褐变等病斑面积小于1%；2级，花蕾病斑面积在1% ~ 5%之间；3级，花蕾病斑面积在5% ~ 20% 之间；4级，花蕾病斑面积大于20%，被侵染花蕾坏死、腐烂或脱落。参照以下公式计算发病率、病情指数、防效及相对防效^[17]：

(2) 植株生长情况及花果发育性状。结合施药后植株生长情况及花果发育性状判断药剂是否安全，若无药害或其他不良影响则评价为安全。参照刘兆鸿等^[18]方法调查植株生长情况，分别调查各处理区猕猴桃叶、嫩梢、花、果实等于施药后是否有药害症状产生。参照孙金秋^[19]的方法，于第2次施药后采用1.2.2(1)中的五点取样法调查各处理的花果发育性状，通过开花率、畸形花率、座果率及畸形果率等指标评价各药剂施用后是否有不良影响。在盛花期调查开花率和畸形花率，对所有已开放花朵进行人工授粉，并疏除未开放花蕾以防影响后期座果率的调查；在谢花后15 d调查各处理的座果率及畸形果率，并疏除畸形果、损伤果、病虫果等发育不良果实，使每根结果枝的叶果比为4 ∶ 1，以保证果实养分供应充足和生长发育正常；在成熟期，从每处理中随机采15个猕猴桃果实称重并计算平均单果质量。各性状指标计算公式如下：

1.3　数据统计与分析

使用Microsoft Excel 2010统计试验数据；使用DPS 7.05软件中的Duncan′s新复极差法进行显著性分析。

2　结果与分析 2.1　不同药剂对猕猴桃花腐病发生情况的影响

如表 3所示，各处理防治前发病情况相当，发病率及病情指数均无显著性差异，防治后则表现出显著差异。第1次施药后，各处理发病情况差异显著，其中对照发病情况最严重，发病率与病情指数分别为6.13% 和3.22，均显著高于其他处理；其次依次是丙硫唑、春雷霉素、四霉素、春雷 • 喹啉铜；春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑发病情况最轻，发病率与病情指数均显著低于其他处理。第2次施药后，各处理发病情况差异显著且趋势与第1次相当，其中发病情况最严重的仍然是对照，发病情况最轻的仍然是春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑。比较防治前后的发病情况，发现各处理发病情况较防治前均呈增加趋势，且发病情况变化值差异显著，其中对照变化值最大，发病率增幅为13.29%，病情指数增幅为6.84；春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑变化值最小，发病率增幅均小于1.50%，病情指数增幅均小于1.00。该结果表明，6种药剂均能有效延缓猕猴桃花腐病病原菌的传播与扩散，减轻发病程度，其中春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑延缓病原菌传播与扩散的能力最强。

2.2　不同药剂对猕猴桃花腐病的田间防效

如表 4所示，不同药剂处理对猕猴桃花腐病的防治效果差异显著。第1次施药后，春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑防治效果最佳，防效及相对防效均显著高于其他处理，达50% 以上；其次是四霉素与春雷 • 喹啉铜；再次是春雷霉素；而防治效果最差的是丙硫唑，防效及相对防效均显著低于其他处理。第2次施药后，各处理对猕猴桃花腐病的防治效果较第1次防治均明显上升，其中防治效果最佳的仍是春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑，防效及相对防效均显著高于其他处理，达75% 以上。分别比较每次防治时春雷 • 溴菌腈、春雷 • 喹啉铜及春雷霉素三者间的防治效果，四霉素 • 丙硫唑、四霉素及丙硫唑间三者间的防治效果，发现复配药剂相较于单剂均表现出更好的防治效果。试验结果表明，田间施药防治1次能一定程度上防治猕猴桃花腐病，连续施药两次则能提高防治效果，其中复配药剂春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑的防治效果最佳，具有较好的应用前景。

2.3　不同药剂对猕猴桃植株生长情况及花果发育性状的影响

田间调查发现，各药剂处理后猕猴桃叶、嫩梢、花、果实均未因施药而引起药害症状。不同药剂处理对猕猴桃花果发育性状的影响差异显著，且均优于对照，无不良影响(表 5)。其中，春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑处理后开花率最高，均达90% 以上；畸形花率最低，均小于2%；座果率最高，均达95% 以上；畸形果率最低，均小于3%；单果质量最大，均达107 g以上，各性状指标均显著优于其他处理。该结果表明，不同药剂处理均具有保花保果作用，并一定程度增加猕猴桃产量，其中保花保果和增产作用最强的是春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑。结合不同药剂对植株生长情况及花果发育性状的影响，发现各药剂施用后对植株无药害且能保花保果并增产，表明这些药剂在推荐使用浓度下对猕猴桃植株安全，适于田间施用。

3　讨论

猕猴桃花腐病危害范围广，在意大利、韩国、日本等国家及我国贵州、广西、陕西、河南等省份均有发生。其发病期多集中在低温多雨的早春花期，若不能及时控制，会对后期果实生长发育带来不良影响，导致严重减产减收^[2-10]。花腐病防控方法中属化学防治最为简单、高效、迅速，本课题组通过前期研究发现四霉素与丙硫唑复配对猕猴桃花腐病菌具有毒力增效作用^[6]，故将其与对应单剂、田间生产常用药剂及对应复配剂用于开展田间试验，以挖掘防治猕猴桃花腐病的新药剂。本研究测定了6种药剂对猕猴桃花腐病的田间防效，筛选出两种防治效果最好的复配药剂春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑，这与猕猴桃生产中长期推广应用的单剂防治法不同^[8-10]。发病情况调查结果表明，6种药剂均能有效延缓猕猴桃花腐病病原菌的传播与扩散，但不能完全阻断，这可能与花腐病菌的蔓延速度快及潜伏隐蔽性有关^[5]；其中，复配药剂春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑延缓病原菌传播与扩散的能力最强，可将发病率与病情指数控制在较低水平，这种病害控制能力与海飞等^[20]的研究结果相似。田间防效试验表明，春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑的防治效果最佳，明显优于对应单剂，这与李聪聪等^[21]的研究结果一致。第2次施药后，各药剂对猕猴桃花腐病的防治效果均较第1次施药明显上升，这说明间隔10 d、连续两次施药是高效防治该病害的技术要点，与闫娟等^[9]的研究结果相似。

猕猴桃生产既要求高效防控病害，又要求兼顾食品安全与环保问题，所以药剂施用后是否造成药害或其他不良影响是值得关注的^[22-23]。本研究结果表明，各药剂处理对猕猴桃叶、嫩梢、花、果实均无药害。进一步测定花果发育性状，发现不同药剂处理较对照均能显著提升猕猴桃花果发育性状，未造成不良影响。其中春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑保花保果增产作用最为明显，这与王垚等^[16]、杨振华等^[24]的研究中生物农药与其他药剂复配可促进作物生长、提高产量的结果相符。对比表 4与表 5，发现其保花保果增产作用与田间防效相对应，表明该作用可能是通过药剂对花腐病的有效防治实现的。药剂处理减弱了花腐病对花的危害，保护花正常生长，为后期果实正常生长发育提供了基础和保障，从而实现保花保果及增产。结合不同药剂对植株生长情况及花果发育性状的影响，发现6种药剂均对猕猴桃植株安全，适于田间施用。

4　结论

本研究通过田间试验测定了6种药剂对猕猴桃花腐病的田间防治效果，结果表明不同药剂处理对猕猴桃花腐病的防治效果存在显著差异，能不同程度延缓病原菌传播与扩散。各药剂施用后对猕猴桃植株无药害产生且能保花保果并增产。其中防治效果最佳的是复配药剂春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑，两者施用后发病率增幅均小于1.50%，病情指数增幅均小于1.00，防效及相对防效均达75% 以上，开花率均达90% 以上，畸形花率均小于2%，座果率均达95% 以上，畸形果率均小于3%，单果质量均达107 g以上。研究发现，在猕猴桃花期，以安全间隔10 d，连续两次喷施适宜浓度的春雷 • 溴菌腈与四霉素 • 丙硫唑，可取得理想的应用效果。可考虑将以上两种药剂作为常用防治药剂的替代品、轮换品进行推广，为田间防治猕猴桃花腐病提供指导。