2024, Vol. 51文章信息
引用本文 |
基金项目
- 中国烟草总公司湖南省公司科技项目（湘烟科〔2022〕24号）
作者简介
- 陈记娟（1997—），女，在读硕士生，研究方向为植物保护，E-mail：1392795488@qq.com.
通讯作者
- 吴建辉（1969—），男，硕士，副研究员，研究方向为植物保护，E-mail：jhw@scau.edu.cn.
文章历史
- 收稿日期：2023-11-14
【研究意义】斜纹夜蛾（Spodoptera litura）属鳞翅目（Lepidoptera）夜蛾科（Noctuidae），是一种分布广、食性杂的农业害虫[1-2]。斜纹夜蛾幼虫阶段的群聚取食对农作物为害最为严重[3]，广泛发生时对农、林、牧业生产和环境绿化等造成巨大经济损失[4-5]，受害植物多达109科389种[6-7]，可造成田间农作物减产26%~100%[8-9]。由于斜纹夜蛾为害性强、世代重叠现象严重，因此在实际生产中的防治难度很大[10-11]。目前对斜纹夜蛾的防治主要依赖化学药剂，但大量、不合理地使用化学药剂使斜纹夜蛾产生了抗药性，种群发展更迅速[12]，因此亟需高效、低毒、无残留的绿色防治手段。虫生真菌在自然界中广泛分布，是昆虫致病菌群之一[13]，其具有对环境危害极小、对人畜及天敌无害、害虫不易产生抗性等优点[14-15]，在害虫的生物防治中具有较大的应用潜力。然而在实际生产应用中，菌种保存与复壮是十分重要的环节。菌种经过多代转接培养后会出现菌丝生长缓慢、产孢量少、甚至在菌苔表面出现一些菌丝孢丛或菌丝束，并在上面产生不育孢子，从而导致菌种毒力降低等退化现象[16-17]，探究恢复甚至提高菌株毒力及产孢量的方法对菌种改良、保存及规模化生产具有重要意义，也可为后续田间应用球孢白僵菌防治斜纹夜蛾提供基础。【前人研究进展】球孢白僵菌（Beauveria bassiana）是一种广谱性昆虫病原真菌，与绿僵菌（Metarhizium）、蜡蚧轮枝菌（Verticillium lecanii）等作为生物农药被广泛应用于生物防治中[18-19]。周立等[20]从79株虫生真菌中筛选出9株球孢白僵菌，在1×108 CFU/mL浓度下处理斜纹夜蛾二龄幼虫校正死亡率最高为70.71%，表明球孢白僵菌对斜纹夜蛾幼虫有较好的防治效果。在菌株大规模生产中，产孢量和致病力的退化直接影响产品质量及防治效果，徐金柱等[21]对球孢白僵菌单孢子继代培养发现，第7代的产孢量显著下降，继代培养10代后2株菌株产孢量比第1代分别下降81.7% 和69.0%。邹东霞等[22]采用虫尸复壮法和活虫法对马尾松毛虫球孢白僵菌进行复壮，结果表明2种复壮方法均可恢复甚至提高菌株的毒力及产孢量。【本研究切入点】由于斜纹夜蛾虫体较大、体壁较厚，且对现有的化学药剂产生严重抗性[23-25]，利用球孢白僵菌对斜纹夜蛾进行防治有较好研发前景，但影响菌株毒力的因素较多，为确保菌株对害虫的生物防治在大规模生产条件下最大化发挥作用，须对菌种的保藏、转接及复壮进行深入研究。目前对球孢白僵菌继代培养的影响研究主要集中在对其菌落形态、颜色、生长以及产孢量的统计，较少对菌株培养代数、产孢量及毒力相关性进行拟合分析。【拟解决的关键问题】本研究采用浸虫法，测定继代培养球孢白僵菌SCAUJH19 F1~F10代处理斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力，采用活虫复壮法对菌株进行复壮并测定其产孢量，进一步比较不同代数菌株的产孢量。通过拟合曲线和相关性分析，明确培养代数与毒力和产孢量变化间的相关性，以期为恢复甚至提高球孢白僵菌产孢量及其对斜纹夜蛾二龄幼虫毒力提供依据。
1 材料与方法试验于2022—2023年在华南农业大学植物保护学院农业害虫生物防治工程技术研究中心开展。
1.1 试验材料1.1.1 供试菌株 供试球孢白僵菌SCAUJH19由华南农业大学生物防治教育部工程研究中心提供，以马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）培养，于4 ℃冰箱中保存。
1.1.2 供试虫源 斜纹夜蛾虫卵购于河南省济源白云实业有限公司，采用人工饲料于智能人工气候箱（宁波江南仪器厂）中继代繁殖形成斜纹夜蛾种群。饲养条件为温度为27（±1）℃，相对湿度75（±5）%，光周期L∶D =14∶10。选取发育历期一致的二龄斜纹夜蛾幼虫用于后续试验。
1.1.3 供试培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：去皮马铃薯200 g，切成小块，加1 L水，煮沸20 min后纱布过滤，滤液中加入葡萄糖20 g、琼脂20 g，搅拌均匀，定容至1 L。121 ℃、20 min高压蒸汽灭菌备用。
1.1.4 0.4% 吐温-80配制 1 L去离子水中加入4 mL吐温-80，磁力搅拌至完全溶解，121 ℃、20 min高压蒸汽灭菌备用。
1.1.5 孢子悬浮液配制 取培养10~14 d的球孢白僵菌菌株平皿，用0.4% 吐温-80洗脱孢子入三角瓶中，振荡使孢子均匀分散后过滤，即孢子母液。将孢子母液稀释至1×108 CFU/mL备用。
1.1.6 人工饲料配制 取黄豆粉100 g、细麦麸80 g、酵母粉26 g、干酪素8 g、抗坏血酸8 g放入塑料盒中，加500 mL水搅拌均匀，静置1 h备用。称取26 g琼脂加入400 mL水中煮沸，加入100 mL溶有1 g氯化胆碱、0.2 g肌醇、2 g山梨酸、0.2 g胆固醇的水，继续煮沸后加入上述饲料充分搅拌，再次煮沸后加入2 mL甲醛，趁热倒入容器中，冷却定型后于4 ℃保存备用。
1.2 试验方法1.2.1 继代培养球孢白僵菌 将供试菌株在超净工作台中接种至PDA平板上，为F1代，在26（±0.5）℃恒温培养箱中培养10~14 d后用接种针挑取F1代孢子接种至新的PDA平板上为F2代，共进行F1~F10代培养，每代培养10皿备用。
1.2.2 球孢白僵菌对斜纹夜蛾幼虫的毒力测定 采用浸蘸法，用毛笔挑取足量的二龄斜纹夜蛾幼虫置于圆形塑料盒（直径8 cm）内，并加入浓度为1×108 CFU/mL的孢子悬浮液（确保每头幼虫都被浸泡到），浸泡约30 s后，移入铺有吸水纸的方形盒子内，待吸干多余水分后，用毛笔轻轻挑取活跃的斜纹夜蛾幼虫放入塑料培养皿（直径12 cm）内。将新鲜人工饲料切成10 mm×10 mm×10 mm的小正方体，浸入浓度为1×108 CFU/mL的孢子悬浮液中30 s后取出，晾干多余水分，每个培养皿放置1块，以0.4% 吐温-80处理作为对照。每个处理25头幼虫，3次重复，所有塑料培养皿用保鲜膜封口并扎孔通气，置于生化培养箱中饲养，每天定时观察记录，连续7 d，并及时将虫尸移出，置于26 ℃培养箱中保湿培养，根据虫尸体表长出物特征判断是否有效死亡，被球孢白僵菌侵染致死的虫尸即为僵虫。计算公式如下：
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1.2.3 产孢量测定 取上述继代培养F1~F10代球孢白僵菌，每代培养14 d，刮取全部孢子，洗脱到20 mL 0.4% 吐温-80中，振荡均匀后用4层纱布过滤，混匀后吸取适量的孢子混悬液置于血球计数板上，静止1 min后采用五点计数法计数，每组重复3次。
1.2.4 菌株复壮 采用活虫复壮法对继代培养的菌株进行复壮。将球孢白僵菌F1~F10代毒力测定中每代被侵染致死的僵虫分别保湿培养10~14 d，在超净工作台内挑取僵虫上的孢子接种于PDA平板、26 ℃恒温培养箱中培养，观察菌株的生长情况。
1.3 数据统计与分析使用SPSS 21.0软件进行数据分析，采用非线性回归分析对F5~F10代菌株产孢量与培养代数的关系进行处理，模型模拟y=aln(x)+b，其中，y代表产孢量（×108 CFU/mL），x代表培养代数，a、b为建模参数；将F1~F10代菌株产孢量与其对二龄斜纹夜蛾幼虫的毒力进行回归分析，模型模拟y=aln(x)+b，其中，y代表二龄斜纹夜蛾幼虫的校正死亡率，x代表产孢量（×108 CFU/mL），并用GraphPad Prism 8非线性回归进行曲线拟合绘制图表；采用单因素方差分析对斜纹夜蛾二龄幼虫死亡率进行处理，并运用Tukey检验差异显著性，用GraphPad Prism 8绘制图表。
2 结果与分析 2.1 F1~F10代球孢白僵菌对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力继代培养F1~F10代球孢白僵菌对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力结果（表 1）显示，F1~F5代菌株对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力无显著差异，处理7 d时校正死亡率为42.44%~45.22%；F6代后对斜纹夜蛾二龄幼虫毒力逐渐降低，F6、F8、F10的校正死亡率分别降至37.00%、22.94%、12.17%。其中，F5代的校正死亡率最高（45.22%），F10代的校正死亡率最低（12.17%）。
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2.2 继代培养球孢白僵菌产孢量的变化
将菌株连续培养10代，结果（表 2）显示F1~F4代菌株产孢量无显著差异，F5代菌株产孢量最高、为10.43×108 CFU/mL；从F5代开始菌株产孢量显著下降，对F5~F10代产孢量与培养代数建立模型模拟，菌株产孢量与继代培养代数符合模型y=-8.0574ln(x)+22.7406（R2=0.9184），且产孢量随培养代数的增加呈下降趋势（图 1）。
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| 图 1 球孢白僵菌继代培养代数与产孢量的关系 Fig. 1 Relationship between subculture of Beauveria bassiana and spore production |
2.3 继代培养球孢白僵菌产孢量与毒力相关性分析
将继代培养F1~F10代菌株产孢量与其对二龄斜纹夜蛾幼虫的毒力进行回归分析，发现菌株的产孢量与对二龄斜纹夜蛾幼虫的校正死亡率符合模型y=37.633ln(x)-41.888，相关系数R2为0.9701；产孢量与毒力之间存在相关性，产孢量高的菌株对二龄斜纹夜蛾幼虫的毒力较高（图 2）。
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| 图 2 继代培养球孢白僵菌产孢量与毒力的相关性 Fig. 2 Correlation between spore production and pathogenicity of subculture of Beauveria bassiana |
2.4 F4、F6、F8、F10代球孢白僵菌复壮后对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力
采用活虫复壮法分别对球孢白僵菌继代培养F4、F6、F8、F10代SCAUJH19菌株复壮后，对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力结果（图 3）表明，在处理后前3 d，各培养代数菌株复壮后的毒力均无显著差异；处理7 d时，除复壮后F10代菌株对斜纹夜蛾幼虫的毒力效果较低，其他培养代数菌株间复壮效果均无显著差异。
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| 小写英文字母不同者表示差异显著 Different lowercase letters represent significant differences 图 3 F4、F6、F8、F10代球孢白僵菌复壮后对斜纹夜蛾二龄幼虫的校正死亡率 Fig. 3 Corrected mortality of second-instar larvae of Spodoptera litura after rejuvenation of F4, F6, F8 and F10 generations of Beauveria bassiana |
2.5 F4、F6、F8、F10代球孢白僵菌复壮前后对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力比较
球孢白僵菌SCAUJH19继代培养F4、F6、F8、F10代菌株复壮前后对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力比较结果（图 4）表明，在处理7 d时，复壮前后菌株对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力均出现极显著差异。处理7 d后，F4代菌株侵染斜纹夜蛾二龄幼虫的校正死亡率从复壮前的42.44% 提高到复壮后的61.67%；F6代菌株从复壮前的37.00% 上升到复壮后的57.56%；F8代菌株从22.94% 提高到57.56%；F10代菌株从12.17% 上升到50.72%。复壮后的致死率均保持在50% 以上，均高于F4、F6、F8、F10复壮前菌株最高致死率（42.44%），同时也均高于复壮前继代培养F1~F10代中的最高致死率（F5代45.22%）。
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| * 表示差异显著，** 表示差异极显著 * represents significant difference, ** represents extremely significant difference 图 4 F4、F6、F8、F10代球孢白僵菌复壮前后对斜纹夜蛾二龄幼虫的校正死亡率 Fig. 4 Corrected mortality of second-instar larvae of Spodoptera litura before and after rejuvenation of F4, F6, F8 and F10 generations of Beauveria bassiana |
2.6 F4、F6、F8、F10代球孢白僵菌复壮前后产孢量比较
球孢白僵菌SCAUJH19继代培养F4、F6、F8、F10代菌株复壮前后的产孢量均出现极显著差异。图 5表明，培养14 d后，F4代菌株的产孢量从复壮前的9.65×108 CFU/mL提升到13.05×108 CFU/mL；F6代从7.62×108 CFU/mL提升到12.42×108 CFU/mL；F8代从5.14×108 CFU/mL提升到12.36×108 CFU/mL；F10代菌株的产孢量从4.69×108 CFU/mL提升到9.88×108 CFU/mL。复壮后菌株的产孢量均高于复壮前的产孢量。
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| * 表示差异显著，** 表示差异极显著 * represents significant difference, ** represents extremely significant difference 图 5 F4、F6、F8、F10代球孢白僵菌复壮前后产孢量情况 Fig. 5 Spore production of F4, F6, F8 and F10 generations of Beauveria bassiana before and after rejuvenation |
3 讨论
目前，化学防控是防治斜纹夜蛾的主导策略，但斜纹夜蛾对常用化学药剂的抗性问题日趋严重[26]。球孢白僵菌是一种广谱性昆虫病原真菌，广泛用于害虫生物防治[27-28]。符小发等[29]利用球孢白僵菌和化学药剂对葡萄斜纹夜蛾幼虫进行防治，结果表明在喷施7 d后，3种化学药剂防效明显减弱，而球孢白僵菌的防效达85.25%，且对葡萄斜纹夜蛾天敌数量无影响，表明球孢白僵菌对斜纹夜蛾幼虫防治有一定效果。菌株在保存与转接培养过程中，由于环境等因素的影响，容易导致菌株生物学特性劣化[30]，如孢子萌发率下降、致病力下降；或由于菌种变异导致菌落形态瘠薄、菌丝徒长、产孢量下降等[31-34]。本研究通过对不同培养代数菌株的产孢量进行比较，发现F1~F5代菌株对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力无显著差异；F6代菌株毒力开始下降，F8代后毒力衰退明显，到F10代菌株对斜纹夜蛾二龄幼虫的校正死亡率仅12.17%；且从F5代开始，菌株产孢量也呈逐代下降的趋势，从F5代的10.43×108 CFU/mL降低到F10代的4.69×108 CFU/mL。张慧等[35]研究发现球孢白僵菌在CMA培养基上连续培养5代后，其对西花蓟马成虫的致病力呈现下降趋势，且单纯以CMA培养基继代培养球孢白僵菌，其产孢量随培养代数呈现指数级下降；景亮亮等[36]研究发现，蜡蚧轮枝菌在不添加任何物质的PDA培养基中对烟粉虱的毒力逐渐降低，接种6代后2株菌株对烟粉虱的致死率逐代降低，这与本研究结果一致。且本研究发现，球孢白僵菌产孢量与毒力之间存在正相关性，产孢量越低，菌株的毒力效果也越低，因此产孢量可作为评估菌株毒力的重要指标。
本研究采用活虫复壮法对球孢白僵菌F4、F6、F8、F10代菌株进行复壮，发现与复壮前相比，对斜纹夜蛾二龄幼虫的致死率均在第4 d存在显著差异（P＜0.05），第6、7 d均差异极显著（P＜0.01）；复壮后菌种处理斜纹夜蛾二龄幼虫7 d的校正死亡率均达50% 以上，且均高于复壮前菌株的最高校正死亡率。该结果与贾丽萍等[37]在研究虫尸复壮法和活虫复壮法对球孢白僵菌的影响结果一致，表明活虫复壮法可使衰退的菌株得到恢复。
4 结论本研究通过测定球孢白僵菌连续继代培养10代的产孢量发现，F1~F5代菌株产孢量为9.65~10.43×108 CFU/mL，从F6代开始呈逐代下降趋势，F6、F8、F10代菌株产孢量分别降至7.62×108、5.14×108、4.69×108 CFU/mL。处理7 d时，F1~F5代间菌株对二龄斜纹夜蛾幼虫的毒力无显著差异，校正死亡率为42.44%~45.22%，F6、F8、F10代的校正死亡率分别降至37.00%、22.94%、12.17%。通过建立模型发现继代培养球孢白僵菌SCAUJH19的产孢量随培养代数呈现指数级下降；且菌株的产孢量与毒力存在正相关性，同一菌株的产孢量可以作为评价菌株毒力的一项重要指标。采用活虫复壮法对F4、F6、F8、F10代菌株进行复壮，复壮后的菌株恢复甚至提高原有的毒力特性，对斜纹夜蛾二龄幼虫的致死率均＞50%，且复壮后菌株的产孢量为9.88~13.05×108 CFU/mL，与复壮前相比差异极显著。
| [1] |
秦厚国, 丁建, 黄水金, 罗任华. 斜纹夜蛾发生量预测预报的研究[J]. 江西农业学报, 2008(9): 64-66. DOI:10.19386/j.cnki.jxnyxb.2008.09.020 QIN H G, DING J, HUANG S J, LUO R H. Study on prediction of population of Spodoptera litura Fabricius[J]. Acta Agriculturae Jiangxi, 2008(9): 64-66. DOI:10.19386/j.cnki.jxnyxb.2008.09.020 |
| [2] |
秦厚国, 汪笃栋, 丁建, 黄荣华, 叶正襄. 斜纹夜蛾寄主植物名录[J]. 江西农业学报, 2006(5): 51-58. DOI:10.19386/j.cnki.jxnyxb.2006.05.017 QIN H G, WANG D D, DING J, HUANG R H, YE Z X. Host plants of Spodoptera litura[J]. Acta Agriculturae Jiangxi, 2006(5): 51-58. DOI:10.19386/j.cnki.jxnyxb.2006.05.017 |
| [3] |
涂业苟, 吴孔明, 薛芳森, 郭予元. 不同寄主植物对斜纹夜蛾生长发育、繁殖及飞行的影响[J]. 棉花学报, 2008(2): 105-109. DOI:10.3969/j.issn.1002-7807.2008.02.005 TU Y G, WU K M, XUE F S, GUO Y Y. Influence of host plants on larval development, adult fecundity and flight ability of the common cutworm Spodoptera litura[J]. Cotton Science, 2008(2): 105-109. DOI:10.3969/j.issn.1002-7807.2008.02.005 |
| [4] |
NATIKAR K P, BALIKAI A R. Present status on bio-ecology and management of tobacco caterpillar, Spodoptera litura (Fabricius)[J]. International Journal of Plant Protection, 2017, 10(1): 193-202. DOI:10.15740/HAS/IJPP/10.1/193-202 |
| [5] |
易希, 廖红东, 郑井元. 植物内生真菌防治根结线虫研究进展[J]. 生物技术通报, 2023, 39(3): 43-51. DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2022-1010 YI X, LIAO H D, ZHENG J Y. Research progress in plant endophytic fungi for root-knot nematode control[J]. Biotechnology Bulletin, 2023, 39(3): 43-51. DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2022-1010 |
| [6] |
LE H T T, PADGHAM J L, HAGEMANN M H, SIKORA R A, SCHOUTEN A. Developmental and behavioural effects of the endophytic Fusarium moniliforme fe14 towards Meloidogyne graminicola in rice[J]. Annals of Applied Biology, 2016, 169(1): 134-143. DOI:10.1111/aab.12287 |
| [7] |
秦厚国, 叶正襄, 黄水金, 丁建, 罗任华. 不同寄主植物与斜纹夜蛾喜食程度、生长发育及存活率的关系研究[J]. 中国生态农业学报, 2004(2): 45-47. QIN H G, YE Z X, HUANG S J, DING J, LUO R H. The correlations of the different host plants with preference level life duration and survival rate of Spodoptera litura Fabricius[J]. Chinese Journal of Eco-Agriculture, 2004(2): 45-47. |
| [8] |
秦厚国, 叶正襄. 斜纹夜蛾灾变规律与控制[M]. 北京: 中国农业科技出版社, 2007. QIN H G, YE Z X. Disaster regularity and control of Calliphora calliphora[M]. Beijing: China Agricultural Science and Technology Press, 2007. |
| [9] |
DONG Z S, ZHANG Y J, DUAN Y B, ZHENG X L, LU W. Influencing factors and selection mechanisms of phytophagous insects for oviposition host plants[J]. Journal of Southern Agriculture, 2017, 48(5): 837-843. DOI:10.3969/j.issn.2095-1191.2017.05.013 |
| [10] |
邓苗苗, 郭晓黎. 植物响应寄生线虫侵染机制的研究进展[J]. 生物技术通报, 2021, 37(7): 25-34. DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-0669 DENG M M, GUO X L. Research progress on plants responses to parasitic nematodes infection[J]. Biotechnology Bulletin, 2021, 37(7): 25-34. DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-0669 |
| [11] |
桑松, 王政, 齐江卫, 舒本水, 钟国华. 斜纹夜蛾抗药性研究进展[J]. 环境昆虫学报, 2013, 35(6): 808-814. DOI:10.3969/j.issn.1674-0858.2013.06.18 SANG S, WANG Z, QI J W, SHU B S, ZHONG G H. Research progresses on pesticide resistance of Spodoptera litura[J]. Journal of Environmental Entomology, 2013, 35(6): 808-814. DOI:10.3969/j.issn.1674-0858.2013.06.18 |
| [12] |
COLLINGE D B, JENSEN B, JORGENSEN H J. Fungal endophytes in plants and their relationship to plant disease[J]. Current Opinion Microbiology, 2022, 69: 102177. DOI:10.1016/j.mib.2022.102177 |
| [13] |
余垚颖, 郭应菊, 杨雪, 王明富. 我国虫生真菌的研究现状[J]. 四川农业科技, 2018(12): 27-29. DOI:10.3969/j.issn.1004-1028.2018.12.015 YU Y Y, GUO Y J, YANG X, WANG M F. Research status of entomogenous fungi in China[J]. Sichuan Agricultural Science and Technology, 2018(12): 27-29. DOI:10.3969/j.issn.1004-1028.2018.12.015 |
| [14] |
李德伟, 吴建辉, 覃振强. 低温胁迫对新菠萝灰粉蚧死亡率的影响[J]. 广东农业科学, 2021, 48(11): 103-111. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2021.11.013 LI D W, WU J H, QIN Z Q. Effect of low temperature stress on the mortality of Dysmicoccus neobrevipes Beardsley[J]. Guangdong Agricultural Sciences, 2021, 48(11): 103-111. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2021.11.013 |
| [15] |
周孚美, 马云明, 单雪华, 伍绍龙, 王秋芽, 刘思乡. 不同化学药剂对烟青虫和斜纹夜蛾的防治效果[J]. 安徽农业科学, 2016, 44(16): 167-169. DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.16.055 ZHOU F M, MA Y M, SHAN X H, WU S L, WANG Q Y, LIU S X. The prevention and control effect of different chemicals on Helicoverpa assulta and Spodoptera litura[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2016, 44(16): 167-169. DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.16.055 |
| [16] |
唐亮, 石美宁, 胡文娟, 黄旭华, 黄深惠, 王霞. 不同方法复壮球孢白僵菌[J]. 广西蚕业, 2015, 52(2): 11-14. DOI:10.19553/j.cnki.1006-1657.2015.02.004 TANG L, SHI M N, HU W J, HUANG X H, HUANG S H, WANG X. Different methods to rejuvenate Beauveria bassiana[J]. Guangxi Sericulture, 2015, 52(2): 11-14. DOI:10.19553/j.cnki.1006-1657.2015.02.004 |
| [17] |
RAJANIKANTH P, SUBBARATNAM G V, RAHAMAN S J. Effect of frequency of subculturing of different isolates of Beauveria bassiana vuillemin on their biological properties[J]. International Journal of Bio-resource and Stress Management, 2011, 2(1): 60-65. DOI:10.1016/j.jip.2017.03.008 |
| [18] |
封海东, 蔡高磊, 欧阳友香, 胡学明, 张凡. 2.5% 溴氰菊酯水乳剂防治烟青虫田间药效[J]. 安徽农业科学, 2016, 44(4): 168-169. DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.04.055 FENG H D, CAI G L, OUYANG Y X, HU X M, ZHANG F. Field control efficacy of lambda-cyhalothrin 2.5% ME against helicoverpa assulta[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2016, 44(4): 168-169. DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.04.055 |
| [19] |
高聪芬, 贾变桃, 沈晋良. 甲维盐等几种杀虫剂对斜纹夜蛾的室内毒力测定[J]. 江苏农业科学, 2005(6): 63-65. DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2005.06.021 GAO C F, JIA B T, SHEN J L. Determination of indoor toxicity of several insecticides, such as embaline, to Calliphora calliphora[J]. Jiangsu Agricultural Sciences, 2005(6): 63-65. DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2005.06.021 |
| [20] |
周立, 张慎, 陈琳, 袁芳, 周向平, 黄石旺, 李佳颖. 斜纹夜蛾高致病力菌株的筛选及四种杀虫剂的毒力测定[J]. 黑龙江农业科学, 2022(4): 44-50. DOI:10.11942/jissn1002-2767.2022.04.0044 ZHOU L, ZHANG S, CHEN L, YUAN F, ZHOU X P, HUANG S W, LI J Y. Screening of high virulence strains and virulence determination of four insecticides[J]. Heilong jiang Agricultural Sciences, 2022(4): 44-50. DOI:10.11942/jissn1002-2767.2022.04.0044 |
| [21] |
徐金柱, 黄勃, 李增智. 球孢白僵菌单孢子分离株在继代培养过程中菌落局变的遗传分析[J]. 菌物学报, 2010, 29(2): 279-284. DOI:10.13346/j.mycosystema.2010.02.017 XU J Z, HUANG B, LI Z Z. Genetic analysis of colony sectorization of Beauveria bassiana single-spore isolates during subculturing[J]. Mycos ystema, 2010, 29(2): 279-284. DOI:10.13346/j.mycosystema.2010.02.017 |
| [22] |
邹东霞, 徐庆玲, 廖旺姣, 黄华艳. 2种方法复壮马尾松毛虫球孢白僵菌的研究[J]. 广西林业科学, 2016, 45(4): 365-368. DOI:10.19692/j.cnki.gfs.2016.04.004 ZOU D X, XU Q L, LIAO W J, HUANG H Y. Two methods of rejuvenation of Beauveria bassiana on Dendrolimus punctatus[J]. Guangxi Forestry Science, 2016, 45(4): 365-368. DOI:10.19692/j.cnki.gfs.2016.04.004 |
| [23] |
魏彬, 林壁润, 孙大元, 郭俊杰, 沈会芳, 蒲小明, 陈泽鹏, 杨祁云. 我国烟草主要病虫害防治药剂登记现状与发展对策[J]. 广东农业科学, 2021, 48(3): 105-114. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2021.03.013 WEI B, LIN B R, SUN D Y, GUO J J, SHEN H F, PU X M, CHEN Z P, YANG Q Y. Situation and development countermeasures of the registration of tobacco pesticides for controlling major diseases and pests in China[J]. Guangdong Agricultural Sciences, 2021, 48(3): 105-114. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2021.03.013 |
| [24] |
姚苗苗, 杨茂发, 武承旭, 耿海霞. 不同寄主植物对斜纹夜蛾生长发育的影响[J]. 广东农业科学, 2016, 43(1): 93-97. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2016.01.018 YAO M M, YANG M F, WU C X, GENG H X. Effects of different host plants on growth and development of Spodoptera litura[J]. Guangdong Agricultural Sciences, 2016, 43(1): 93-97. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2016.01.018 |
| [25] |
李佳颖, 肖志鹏, 张慎, 蔡海林, 滕凯, 曾维爱, 伍绍龙, 周向平. 球孢白僵菌SCAUJH19和甲维盐对斜纹夜蛾的协同作用及制剂研究[J]. 山地农业生物学报, 2023, 42(2): 8-16. DOI:10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2023.02.002 LI J Y, XIAO Z P, ZHANG S, CAI H L, TENG K, ZENG W A, WU S L, ZHOU X P. Study on synergistic effect and preparation of Beauveria bassiana SCAUJH19 and metretinate on Sphaeroides[J]. Journal of Mountain Agriculture and Biology, 2023, 42(2): 8-16. DOI:10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2023.02.002 |
| [26] |
田艺帆, 张正坤, 隋丽, 赵宇, 路杨, 孟钊, 石旺鹏, 李启云. 斜纹夜蛾高致病力生防真菌的筛选与鉴定[J/OL]. 中国生物防治学报: 1-9[2023-09-27].https://doi.org/10.16409/j.cnki.2095-039x.2023.01.050. TIAN Y F, ZHANG Z K, SUI L, ZHAO Y, LU Y, MENG Z, SHI W P, LI Q Y. Screening and identification of biocontrol fungus with high pathogenicity against Spodoptera litura[J/OL]. Chinese Journal of Biological Control: 1-9[2023-09-27]. https://doi.org/10.16409/j.cnki.2095-039x.2023.01.050. |
| [27] |
张云月, 张军, 李丽莉, 杜茜, 王振营, 汪洋洲, 李启云. 球孢白僵菌有性世代培养及子代毒力稳定性鉴定[J]. 中国生物防治学报, 2017, 33(3): 364-370. DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2017.03.010 ZHANG Y Y, ZHANG J, LI L L, DU Q, WANG Z Y, WANG Y Z, LI Q Y. Development of teleomorph from Beauveria bassiana and virulence stability of its progeny[J]. Chinese Journal of Biological Control, 2017, 33(3): 364-370. DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2017.03.010 |
| [28] |
林海萍, 韩正敏, 张昕, 毛胜凤. 球孢白僵菌研究现状及提高其杀虫效果展望[J]. 浙江林学院学报, 2006, 23(5): 575-580. DOI:10.3969/j.issn.2095-0756.2006.05.020 LIN H P, HAN Z M, ZHANG X, MAO S F. Research status of Beauveria bassiana and prospect of improving its insecticidal effect[J]. Journal of Zhejiang Forestry College, 2006, 23(5): 575-580. DOI:10.3969/j.issn.2095-0756.2006.05.020 |
| [29] |
符小发, 李益, 高强, 梁其干, 陈积豪, 张浩. 球孢白僵菌防治葡萄斜纹夜蛾药效试验[J]. 农村科技, 2022(5): 37-39. DOI:10.19777/j.cnki.issn1002-6193.2022.05.012 FU X F, LI Y, GAO Q, LIANG Q G, CHEN J H, ZHANG H. Efficacy test of Beauveria bassiana to control Sphygma[J]. Rural Science & Technology, 2022(5): 37-39. DOI:10.19777/j.cnki.issn1002-6193.2022.05.012 |
| [30] |
李娟, 吴圣勇, 王晓青, 王帅宇, 雷仲仁. 防治西花蓟马的球孢白僵菌菌株筛选及耐热性测定[J]. 中国生物防治学报, 2015, 31(6): 845-852. DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2015.06.005 LI J, WU S Y, WANG X Q, WANG S Y, LEI Z R. Screening of Beauveria bassiana strains against Frankliniella occidentalis and their conidial thermotolerance[J]. Chinese Journal of Biological Control, 2015, 31(6): 845-852. DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2015.06.005 |
| [31] |
张正坤, 孙召朋, 张语迟, 徐文静, 潘洪玉, 李启云. 继代培养对球孢白僵菌毒素产生水平的影响[J]. 中国农学通报, 2012, 28(24): 243-249. DOI:10.3969/j.issn.1000-6850.2012.24.046 ZHANG Z K, SUN Z P, ZHANG Y C, XU W J, PAN H Y, LI Q Y. Influence on the toxin production level of Beauveria bassiana during subculturing[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2012, 28(24): 243-249. DOI:10.3969/j.issn.1000-6850.2012.24.046 |
| [32] |
唐晓庆, 樊美珍, 李增智. 球孢白僵菌继代培养中菌落局变现象及环境影响因素的研究[J]. 真菌学报, 1996, 15(3): 188-196, 243. DOI:10.13346/j.mycosystema.1996.03.007 TANG X Q, FAN M Z, LI Z Z. Study on colony variation and environmental factors in subculture of Beauveria bassiana[J]. Mycosystema, 1996, 15(3): 188-196, 243. DOI:10.13346/j.mycosystema.1996.03.007 |
| [33] |
汪黎明, 陈雪, 徐延平, 胡晓磊, 何灵敏, 黄勃, 李增智. 一株球孢白僵菌转基因工程菌在继代培养中的变异[J]. 菌物学报, 2011, 30(5): 738-743. DOI:10.13346/j.mycosystema.2011.05.004 WANG L M, CHEN X, XU Y P, HU X L, HE L M, HUANG B, LI Z Z. Variation of a transgenic strain of Beauveria bassiana during subculturing[J]. Mycosystema, 2011, 30(5): 738-743. DOI:10.13346/j.mycosystema.2011.05.004 |
| [34] |
黄大庆, 姚剑. 球孢白僵菌菌株产孢量及其与毒力关系的研究[J]. 宿州师专学报, 2004(2): 106-108. DOI:10.3969/j.issn.1673-2006.2004.02.039 HUNG D Q, YAO J. Study on spore production and its relationship with virulence of Beauveria bassiana strains[J]. Journal of Suzhou University, 2004(2): 106-108. DOI:10.3969/j.issn.1673-2006.2004.02.039 |
| [35] |
张慧, 吴圣勇, 李娟, 张璐璐, 张林雅, 雷仲仁. 不同培养基继代培养球孢白僵菌对西花蓟马毒力和产孢量的影响[J]. 中国农业科学, 2016, 49(15): 2977-2987. DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2016.15.012 ZHANG H, WU S Y, LI J, ZHANG L L, ZHANG L Y, LEI Z R. Influence of subculture on virulence to Frankliniella occidentalis and conidial production of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2016, 49(15): 2977-2987. DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2016.15.012 |
| [36] |
景亮亮, 姜灵, 谢婷, 张晓霞, 洪波, 贾彦霞. 不同培养基继代培养蜡蚧轮枝菌对产孢量和烟粉虱毒力的影响[J]. 植物保护, 2020, 46(5): 70-76. DOI:10.16688/j.zwbh.2019343 JING L L, JIANG L, XIE T, ZHANG X X, HONG B, JIA Y X. Influences of subculture on the virulence to Bemisia tabaci and conidial production of the entomopathogenic fungus Verticillium lecanii[J]. Plant Protection, 2020, 46(5): 70-76. DOI:10.16688/j.zwbh.2019343 |
| [37] |
贾丽萍, 王宏勋, 陆俊宇, 杨云波, 高源, 王兴. 2种复壮方法对球孢白僵菌菌种复壮的影响分析[J]. 林业调查规划, 2020, 45(6): 42-45. DOI:10.3969/j.issn.1671-3168.2020.06.008 JIA L P, WANG H X, LU J Y, YANG Y B, GAO Y, WANG X. Rejuvenation results of Beauveria bassiana by two methods[J]. Forest Inventory and Planning, 2020, 45(6): 42-45. DOI:10.3969/j.issn.1671-3168.2020.06.008 |
(责任编辑 陈丽娥)