马秀丽, 冯涛, 宋敏训, 李峰, 廖明, 辛朝安.鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立与初步应用[J].广东农业科学,2007,(7):81-84 |
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鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立与初步应用 |
Establishment of reverse transcriptional polymerase chain reaction for detection of duck hepatitis virus |
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DOI:10.3969/j.issn.1004-874X.2007.07.029 |
中文关键词: 鸭病毒性肝炎病毒, Ⅰ型, RT-PCR, 检测 |
英文关键词: |
基金项目:山东省自然科学基金 |
作者 | 单位 | 马秀丽, 冯涛, 宋敏训, 李峰, 廖明, 辛朝安 | 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642 山东省兽药监察所,山东,济南,250022 山东省兽药监察所,山东,济南,250022 山东省农科院家禽研究所,山东,济南,250023 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642 |
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中文摘要: |
根据GenBank中Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)的基因序列设计、合成引物,以山东、江苏、广东等地分离株的RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到预期大小的目的片段.将山东分离株扩增的目的片段克隆到pGM-T载体,酶切鉴定得到阳性重组质粒.对重组质粒进行序列测定,与参考毒株R85952的序列比较发现,山东分离株与参考序列的同源性为974%.试验结果表明,所建立的RT-PCR方法最低模板检出量为100 pg,且该方法只能特异地检测出DHV,不能检出鸭瘟病毒、小鹅瘟病毒、鹅副粘病毒和番鸭细小病毒等.自然感染病料的检测分离结果表明,该方法既可用于DHV-Ⅰ分离株的快速鉴定,也可用于临床感染病例的检测与诊断. |
英文摘要: |
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