高秋芳, 郭安平, 孔华, 邓伟科, 贺立卡.果胶裂解酶、木聚糖酶及果胶裂解酶、木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达[J].广东农业科学,2010,(8):1-5 |
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果胶裂解酶、木聚糖酶及果胶裂解酶、木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 |
Expression of pectin lyase gene、 xylanase gene、 pectin lyase gene and Xylanase gene in Pichia pastoris |
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DOI:10.3969/j.issn.1004-874X.2010.08.001 |
中文关键词: 果胶裂解酶, 木聚糖酶, 表达, 毕赤酵母 |
英文关键词: |
基金项目:[国家高技术研究发展计划(863计划), 国家公益性行业科研专项] |
作者 | 单位 | 高秋芳, 郭安平, 孔华, 邓伟科, 贺立卡 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南,海口,571101 海南大学农学院,海南,海口,570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南,海口,571101 |
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中文摘要: |
运用RT-PCR技术,从绿色木霉(AS3.3711) mRNA中扩增出木聚糖酶基因xyn2,并与质粒pPIC9K相连,构建了表达载体pPIC9K-xyn2,转化毕赤酵母GS115,并且将pPIC9K-xyn2和pPIC9K-PelC(果胶裂解酶)同时转化毕赤酵母GS115,通过组氨酸营养缺陷型筛选,G418高拷贝菌株筛选,以及摇瓶诱导表达筛选,分别得到一株高表达术聚糖酶毕赤酵母菌株X5和一株同时高表达木聚糖酶和果胶裂解酶毕赤酵母菌株PX6.同时,将一株高表达果胶裂解酶毕赤酵母菌株P2保存.重组酶酶学性质分析表明,P2和PX6分泌果胶裂解酶,X5和PX6分泌木聚精酶最适温度均为50℃;P2分泌果胶裂解酶最适pH5.4,最大酶活为14.2U/mL;X5分泌木聚糖酶最适pH6.0,最大酶活为5.8 U/mL:PX6分泌果胶裂解酶最适pH5.4,最大酶活为12.6 U/mL,分泌木聚糖酶最适pH6.0,最大酶活为4.2 U/mL. |
英文摘要: |
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