潘伟明, 刘文, 杨妙贤, 刘胜洪, 梁红.银杏GAPDH基因序列的初步克隆[J].广东农业科学,2010,(8):196-198 |
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银杏GAPDH基因序列的初步克隆 |
Preliminary cloning of GAPDH gene sequence in Ginkgo biloba |
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DOI:10.3969/j.issn.1004-874X.2010.08.079 |
中文关键词: 银杏, GAPDH基因, RT-PCR |
英文关键词: |
基金项目:广东省科技计划项目 |
作者 | 单位 | 潘伟明, 刘文, 杨妙贤, 刘胜洪, 梁红 | 仲恺农业工程学院科技处,广东,广州,510225 仲恺农业工程学院生命科学学院,广东,广州,510225 |
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中文摘要: |
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是生物体内精酵解作用中的一个关键酶,由于其在细胞中表达量相对恒定而在植物研究中常被作为内源参照基因.在提取高质量银杏叶片总RNA的基础上,运用RT-PCR法对银杏GAPDH基因的部分序列进行了克隆.研究结果表明,使用SP提取法提取的银杏叶片组织总RNA质量高,28S RNA和18S RNA条带明亮清晰;用Oligo(dT)18为反转录引物,合成第一链,再利用GA PDH基因特异扩增引物进行PCR扩增,获得了银杏GA PDH基因的特异性cDNA片段,其长度大约为500 bp.GA PDH基因的成功克隆为半定量RT-PCR以及Real-time RT-PCR等技术在银杏分子生物学研究中的应用提供了内标参照物. |
英文摘要: |
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