| 罗思思, 谢芝勋, 邓显文, 刘加波, 庞耀珊, 谢志勤, 谢丽基, 彭宜.Ⅰ群禽腺病毒五邻体基因的克隆及原核表达[J].广东农业科学,2011,38(7):154-157 |
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Ⅰ群禽腺病毒五邻体基因的克隆及原核表达 |
| Cloning and prokaryotic expression penton gene of Aviadenovirus Group Ⅰ |
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| DOI：10.3969/j.issn.1004-874X.2011.07.057 |
| 中文关键词: Ⅰ群禽腺病毒, 克隆, penton, 原核表达 |
| 英文关键词: |
| 基金项目:[新世纪百千万人才工程专项, 广西科技攻关计划, 广西自然科学基金] |
| 作者 | 单位 | | 罗思思, 谢芝勋, 邓显文, 刘加波, 庞耀珊, 谢志勤, 谢丽基, 彭宜 | 广西大学动物科学技术学院,广西,南宁,530005
广西兽医研究所,广西,南宁,530001 |
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| 中文摘要: |
| 根据GenBank中Ⅰ群禽腺病毒(AAV)基因组序列,设计了1对特异性引物.以CELO毒株基凶组DNA为模板,通过PCR扩增出结构蛋白五邻体基因(penton),将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1的EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ位点,构建了原核表达载体pGEX-penton.将其转化到感受态细胞DH5α中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,获得了45.9 ku的融合蛋白.用不同的IPTG浓度和时间诱导表达,得出诱导的最佳IPTG浓度为1.5 mmol/L,最佳时间为4 h.用尿素提取包涵体表达产物,得到penton纯化蛋白,浓度为2.98 mg/mL.经Western-bolt分析,该蛋白具有良好的反应原性. |
| 英文摘要: |
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