姚晓辉, 李华强, 陈瑞爱, 练炳洲, 王林川, 邓月嫦, 王凤国.BVDV荧光RT-PCR检测方法的建立及应用[J].广东农业科学,2011,38(11):154-157 |
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BVDV荧光RT-PCR检测方法的建立及应用 |
Establishment and application the fluorescence RT-PCR detection method of BVDV |
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DOI:10.3969/j.issn.1004-874X.2011.11.056 |
中文关键词: BVDV, 荧光RT-PCR, 检测方法 |
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根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)毒株序列,选择5'NTR保守区域设计1对特异性引物和1条Tagnum探针,通过矩阵法筛选引物探针的最佳浓度,建立了检测BVDV的荧光RT-PCR方法.结果显示,用1.5μL上下游引物混合液(10 μmol/L)和0.5 μL探针溶液(10 μmol/L)对BVDV进行检测,可获得较小Ct值、较高吸光值,并可降低检测成本.对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验,结果表明,该方法敏感性高、特异性强、重复性好.将该方法应用在疫苗生产中,可快速准确地筛选出合格的原辅材料和半成品,为生产提供及时准确可靠的数据. |
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