贺华良, 宾淑英, 廖泓之, 陈颖, 林进添.黄曲条跳甲钾离子通道基因实时荧光定量PCR质粒标准品的构建[J].广东农业科学,2012,39(14):142-145 |
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黄曲条跳甲钾离子通道基因实时荧光定量PCR质粒标准品的构建 |
Construction of reference standards for detecting potassium channel (twk) of Phyllotreta striolata (Fabricius) with fluorescence real-time quantitative PCR |
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DOI:10.3969/j.issn.1004-874X.2012.14.044 |
中文关键词: 黄曲条跳甲, 荧光定量PCR, 质粒标准品 |
英文关键词: |
基金项目:[国家自然科学基金青年基金, 仲恺农业工程学院校级科研基金] |
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构建黄曲条跳甲钾离子通道基因(twk)荧光实时定量PCR标准品.利用twk基因为目的基因设计引物,通过PCR、电泳、胶回收,然后与pMD18-T Vector连接并转化到感受态大肠杆菌中;氨苄青霉素筛选出白色菌落,进行菌落PCR及测序鉴定其特异性,根据OD值确定浓度,制备梯度浓度参考标准品,制作标准曲线.成功构建了twk基因实时荧光定量PCR质粒标准品,为黄曲条跳甲体内twk的精确定量,以及其他靶标基因表达的定量分析提供了重要参考. |
英文摘要: |
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