| 郭锐进, 刘学群, 谭艳平, 程钢.水稻HL-CMS中线粒体基因orf216原核表达载体构建及蛋白纯化[J].广东农业科学,2012,39(16):146-148 |
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水稻HL-CMS中线粒体基因orf216原核表达载体构建及蛋白纯化 |
| Protokaryotic expression and purification of mitochondria ORF216 protein in honglian cytoplasmic male sterile rice line |
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| DOI：10.3969/j.issn.1004-874X.2012.16.046 |
| 中文关键词: 水稻, 原核表达, 组氨酸标签, 亲和纯化 |
| 英文关键词: |
| 基金项目:国家自然科学基金面上项目 |
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| 中文摘要: |
| 将orf216基因克隆到含有组氨酸标签的原核表达载体pET-30a(+)中,得到重组质粒pET-30a(+)-orf216,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)plys菌株感受态细胞,经IPTG诱导后,SDS-PAGE和Western Blot检测分析表达产物.通过Ni-NTA亲和层析系统纯化获得高纯度目的蛋白.研究结果表明,成功构建了pET-30a (+)-orf216原核表达载体并转化大肠杆菌.SDS-PAGE和Western Blot结果显示30 ku处有单一条带,确定其能高效表达并且诱导去达产物为ORF216蛋白.同时对利用Ni-NTA层析系统纯化高纯度高含量ORF216融合蛋白的条件进行了优化. |
| 英文摘要: |
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