胡珊娜 1 、 徐 立 2 、 李志英 2 、 雍 伟 1.花青素合成转录因子表达载体的构建
及遗传转化油菜研究[J].广东农业科学,2014,41(11):149-153 |
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花青素合成转录因子表达载体的构建
及遗传转化油菜研究 |
St udy on cons t ruct i on ofant hocyani n t rans cri pt i on f act orexpres s i on vect orand t rans f orm at i on i nt o Br as s i ca napus |
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DOI: |
中文关键词: M YB 基因 柱花草 遗传转化 |
英文关键词: ant hocyani n t r anscr i pt i on f act or expr essi on vect or Br assi ca napus |
基金项目:农业部野948冶项目(2010-S6);海南省自然科学基
金(310070) |
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中文摘要: |
通过 PCR 扩增得到红掌(Ant hur i um andr aeanum)的 M YB 基因全长、将 M YB 基因片段克隆到 pM D18-T
载体上、然后将此基因插入 CaM V35S启动子后构建成表达载体 Cam35S-GFP-M YB。 通过冻融法将带有目的基因的
表达载体导入根癌农杆菌、 并转化热研 2 号柱花草获得转基因植株若干。 抽取 10 株转化的柱花草植株的基因组
DNA 进行 PCR 分子验证、结果表明有 6株阳性、M YB 基因已成功整合到柱花草的基因组中。转基因柱花草植株的获
得为柱花草等豆科牧草的适口性和抗逆性的提高提供了可能、 并且为以后柱花草的遗传转化工作提供了可靠的依
据。 |
英文摘要: |
:Ant hocyani ns ar e f l avonoi d der i vat i vesand have good ant i oxi dantcapaci t y.Br assi ca napus i s a ki nd ofoi l
pl antand wi despr ead al lover t he wor l d.However ,ant hocyani n l eveland ant i oxi t antcapaci t y ofB.napus ar e l ow.And,
l i t t l e at t ent i on i s pai d t o genet i c t r ansf or mat i on ofsnapdr agon Ant i r r hi num maj us ant hocyani n bi osynt hesi s t r anscr i pt i on
f act or s i nt o B.napus t o enhance t he ant hocyani n cont ent .I n t hi s st udy,Roseal 1 and Del i l a gene f r agmentwer e ampl i f i ed
by PCR f r om snapdr agon A.maj us cDNA,r espect i vel y.Then,t he t wo gene f r agment s wer e cl oned i nt o pDH51 i ncl udi ng
35S pr omot er and 35S t er mi nat or r espect i vel y.Fr agment s cont ai ni ng 35S pr omot er ,t ar getgene and 35S t er mi nat or wer e
l i gat ed i nt o pBI N19 r espect i vel y,r esul t i ng i n t he expr essi on vect orpBI N-Del i l a-Roseal 1 cont ai ni ng doubl e 35S pr omot er
and t er mi nat or .The cal l us oft he t r ansf or med B.napus t ur ned outt o be pur pl e compar ed t o t hatoft he wi l d-t ype st r ai n.
The r esul tpr ovi desbasi sf orusi ng genet i c engi neer i ng t echnol ogy t o i ncr ease t he ant hocyani n l evel sofB.napus. |
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