胥华伟 1 , 王 海 2 , 莫亿伟 2.水稻 OsPIN1b 基因 GFP 融合表达
载体构建及转化水稻的研究[J].广东农业科学,2015,42(24):146-150 |
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水稻 OsPIN1b 基因 GFP 融合表达
载体构建及转化水稻的研究 |
Construction and transformation of GFP fusionexpression vector of rice OsPIN1b gene |
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DOI: |
中文关键词: 水稻 OsPIN1b 负向光性 |
英文关键词: rice(Oryza sativa) OsPIN1b negative…phototropism |
基金项目:国家自然科学基金(31071353, 31100197) |
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中文摘要: |
水稻生长素输出载体 OsPIN1a 可能参与调控水稻根负向光性反应。 为了进一步研究其他 OsPIN
基因与水稻根负向光性的关系, 以 GenBank 数据库报道的 OsPIN1b 核苷酸序列为基础, 设计特异引物以 RT-
PCR 从水稻 cDNA 中扩增得到 OsPIN1b 基因。 测序结果表明获得完整的 OsPIN1b 基因 ORF 序列; 生物信息学
分析表明, OsPIN1b 基因序列全长 1…665…bp, 与已报道的序列相吻合, 其 GC 含量为 64.08%, 编码 554 个氨
基酸。 进一步构建了该基因的 GFP 融合表达载体 pCAMBIA-1301-OsPIN1b∷GFP 并转化水稻中花 11, 分
子检测和 GUS 染色表明外源片段已经成功整合到水稻基因组, 为研究 OsPIN1b 在水稻根负向光性中的作用奠
定基础。 |
英文摘要: |
Earlier…research…results…showed…that…rice…auxin…efflux…protein…OsPIN1a…probably…participated…
in…regulating…negative…phototropism…of…rice…roots.…To…explore…the…relationship…between…other…OsPIN…genes…and…
negative…phototropism…of…rice…roots, gene-specific…primers…were…used…to…amplify…OsPIN1b gene…by…RT-PCR…based…
on…the…OsPIN1b sequence…in…GenBank.…Sequencing…result…showed…that…the…full…ORF…was…obtained(1…665…bp).…
Bioinformation…analysis…showed…that…the…sequence…was…100%…identity…with…the…reported…sequence, the…GC…content…of…
OsPIN1b…ORF…was…64.08%…and…OsPIN1b…encoded…554…amino…acid…residues.…The…OsPIN1b-green fluorescent protein
(gfp)fusion…expression…vector…pCAMBIA-1301-OsPIN1b∷GFP…was…constructed…and…transformed…into…Japonica…
rice…Zhonghua11…by…Agrobacterium tumefaciens.…Molecular…detection…and…GUS…assay…showed…that…the…target…construct…
was…integrated…into…the…genome…of…rice, which…laid…the…foundation…for…further…study…of…the…function…of…OsPIN1b…in…
regulating…negative…phototropism…of…rice…roots. |
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