陈亚红,刘早利,王春台,刘新琼.水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2的克隆及原核表达[J].广东农业科学,2016,43(4):33-37 |
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水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2的克隆及原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of broad-spectrum resistance negative control gene OsSSI2 from rice |
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DOI:doi:10.16768/j.issn.1004-874X.2016.04.008 |
中文关键词: 水稻 OsSSI2 基因 原核表达载体 诱导表达 |
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水稻OsSSI2 基因负调控水稻的抗病反应,为了研究该基因的抗性机理,构建pGEX-6P1-OsSSI2原核表达载体,转化大肠杆菌BL21 细胞后利用IPTG 诱导外源蛋白表达并优化表达条件,使用SDS-PAGE 和Western Blot 检测分析表达产物。结果表明:成功构建了pGEX-6P1-OsSSI2 原核表达载体后进行原核表达,在IPTG 浓度为0.3 mmol/L,温度为25℃,诱导表达7 h,通过SDS-PAGE 和Western Blot 检测发现OsSSI2 蛋白的可溶性表达量最多,为进一步研究水稻OsSSI2 蛋白的抗性机理奠定了基础。 |
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