广东农业科学  2021, Vol. 48 Issue (2): 11-16   DOI: 10.16768/j.issn.1004-874X.2021.02.002.
0

文章信息

引用本文
徐磊, 刘洋. 高粱组Ⅲ WRKY转录因子对干旱胁迫的表达分析[J]. 广东农业科学, 2021, 48(2): 11-16.   DOI: 10.16768/j.issn.1004-874X.2021.02.002
XU Lei, LIU Yang. Expression Analysis of Group Ⅲ WRKY Transcription Factors in Sorghum Under Drought Stress[J]. Guangdong Agricultural Sciences, 2021, 48(2): 11-16.   DOI: 10.16768/j.issn.1004-874X.2021.02.002

基金项目

中国热带农业科学院基本科研业务费专项资金(1630102017002)

作者简介

徐磊(1984—),男,硕士,助理研究员,研究方向为热带旱作遗传改良,E-mail:xulei00100@163.com.

通讯作者

刘洋(1980—),男,博士,副研究员,研究方向为热带旱作遗传改良,E-mail:lyfull@163.com.

文章历史

收稿日期:2020-10-27
高粱组Ⅲ WRKY转录因子对干旱胁迫的表达分析
徐磊 , 刘洋     
中国热带农业科学院湛江实验站 / 广东省旱作节水农业工程技术研究中心,广东 湛江 524013
摘要:【目的】 组Ⅲ WRKY基因在植物应对非生物胁迫中起重要调控作用,分析其家族成员响应干旱胁迫的表达谱,为该类基因的生物学功能研究提供参考。【方法】 利用NCBI数据库下载高粱基因芯片数据,分析组Ⅲ WRKY基因响应干旱胁迫、热胁迫和复合胁迫的表达谱;以20% PEG6000模拟干旱胁迫处理高粱品种BTx623幼苗,采用qRT-PCR技术检测基因表达谱。【结果】 基因芯片分析结果表明,SbWRKY14SbWRKY32在干旱胁迫、热胁迫和复合胁迫时下调表达;SbWRKY39在干旱胁迫、热胁迫时下调表达,但在复合胁迫时上调表达;SbWRKY41在3种胁迫处理均上调表达。qRT-PCR检测结果表明,经干旱胁迫处理,SbWRKY10在处理后3、6 h下调表达,而在处理后12 h上调表达;SbWRKY14在处理后1、6、12 h下调表达;SbWRKY16SbWRKY38SbWRKY41SbWRKY42在处理后1、3、6、12 h下调表达;SbWRKY17在处理后1、6、12 h下调表达;SbWRKY39SbWRKY89在处理后1、3、12 h下调表达;SbWRKY53在处理后1、12 h下调表达,而在处理后6 h上调表达;SbWRKY75在处理后1 h下调表达,而在处理后3、6、12 h上调表达;SbWRKY93在处理后6 h上调表达。【结论】 高粱组Ⅲ WRKY基因可能在高粱应对干旱胁迫中发挥重要作用,不同的SbWRKY基因在应对干旱压力下可能起不同的调控作用。
关键词WRKY基因    转录因子    高粱    干旱胁迫    PEG处理    
Expression Analysis of Group Ⅲ WRKY Transcription Factors in Sorghum Under Drought Stress
XU Lei , LIU Yang     
Zhanjiang Experiment Station, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Guangdong Engineering Technology Research Center for Dryland Water-Saving Agriculture, Zhanjiang 524013, China
Abstract: 【Objective】 Group Ⅲ WRKY genes play an important regulatory role in plant response to abiotic stress. The research was performed to analyze the expression profiles of their family members in response to drought stress so as to provide references for the study of biological function of such genes. 【Method】 Downloading the microarray data from NCBI database, the expression profiles of group Ⅲ WRKY genes in response to drought, heat and combined stress were analyzed. Seedlings of sorghum variety BTx623 were treated with 20% PEG6000 under simulated drought stress, the expression profiles of these genes were detected by qRT-PCR techniques. 【Result】 Microarray analysis shows that SbWRKY14 and SbWRKY32 are down-regulated under drought, heat and combined stress. SbWRKY39 is down-regulated under drought and heat stress, but up-regulated under combined stress. SbWRKY41 is up-regulated under three stress treatments. qRT-PCR analysis shows that SbWRKY10 is down-regulated at 3 and 6 h, but up-regulated at 12 h. SbWRKY14 is down-regulated at 1, 6 and 12 h. SbWRKY16, SbWRKY38, SbWRKY41 and SbWRKY42 are down-regulated at 1, 3, 6 and 12 h. SbWRKY17is down-regulated at 1, 6 and 12 h. SbWRKY39 and SbWRKY89 are down-regulated at 1, 3 and 12 h. SbWRKY53 is downregulated at 1 and 12 h while up-regulated at 6 h. The expression of SbWRKY75 is down-regulated at 1 h and up-regulated at 3, 6 and 12 h. SbWRKY93 is up-regulated at 6 h. 【Conclusion】 These results indicate that the group Ⅲ WRKY genes of sorghum may play an important role in response to drought stress, and different SbWRKY genes may play different regulatory roles under drought stress.
Key words: WRKY gene    transcription factor    sorghum    drought stress    PEG treatment    

【研究意义】高粱(Sorghum bicolor)是禾本科高粱属1年生草本植物,不仅是世界上重要的粮食和能源作物,也是优质的饲料作物。高粱具有耐旱、耐涝、耐盐碱等多种特性[1],其基因组较小(约750 Mb),具有丰富的遗传多样性,其优良的基因资源在作物改良中具有广阔的应用前景[2]。转录因子又称反式作用因子,对转录过程起诱导或抑制作用[3]。WRKY转录因子作为植物中一类重要转录因子,广泛参与植物生长发育、响应激素诱导和生物及非生物胁迫等生物学进程[4],开展高粱WRKY基因耐旱性表达特征分析具有重要意义,可为高粱WRKY基因的功能研究奠定基础。【前人研究进展】 WRKY基因家族作为高等植物中备受关注的基因家族之一,自第一个WRKY转录因子基因从甘薯中克隆以来[5],随着许多物种基因组测序工作完成,越来越多的WRKY基因从基因组水平上鉴定出来,已在青稞[6]、中粒咖啡[7]、大麦[8]和杨树[9]基因组分别鉴定了41、49、98、122个WRKY基因。WRKY转录因子包含1~2个保守WRKY结构域,结构域由约60个氨基酸序列组成,其保守的7个核心氨基酸序列为“WRKYGQK”。根据WRKY保守结构域数目和锌指结构类型,可将WRKY转录因子分为组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅲ三大类,其中组Ⅱ又分为5个亚类(Ⅱ a~ Ⅱ e)。组Ⅰ WRKY转录因子包含2个WRKY结构域,其锌指结构的氨基酸类型为C2H2,组Ⅱ和组Ⅲ转录因子只含有1个WRKY结构域,锌指类型分别为C2H2、C2HC型[10]。据报道,WRKY转录因子参与了植物生长发育的许多进程,如开花[11]、次级代谢物合成[12]和衰老[13]等。也有较多研究表明,WRKY转录因子响应各种压力胁迫,如玉米ZmWRKY62-like基因响应盐和干旱胁迫[14];小麦TaWRKY33受盐胁迫诱导表达,TaWRKY33转基因拟南芥比对照具有更好的耐盐性[15];甜高粱SSWRKY28SSWRKY76基因的表达结果表明,它们可能在应答干旱胁迫时发挥一定作用[16];高粱SbWRKY30基因通过影响拟南芥和水稻的根系结构来提高对干旱胁迫的耐受性,拟南芥和水稻的转基因植株在干旱胁迫后脯氨酸含量、SOD、POD和CAT酶活性高于野生型植株,而MDA含量低于野生型植株[17]。【本研究切入点】前人研究结果表明,组Ⅲ WRKY成员广泛参与植物生长发育进程、生物和非生物胁迫应答反应[18]。赵兴奎等[19]已从高粱基因组鉴定了16个组Ⅲ WRKY成员,但没有研究其响应逆境胁迫的表达谱。【拟解决的关键问题】本研究以高粱品种BTx623为试材,采用PEG6000溶液模拟干旱胁迫[20-21],研究高粱组Ⅲ WRKY成员响应干旱胁迫的表达谱,为挖掘耐旱候选基因提供参考。

1 材料与方法 1.1 试验材料

供试高粱品种为BTx623,由广东省旱作节水农业工程技术研究中心保存,该材料有参考基因组序列,为中等耐旱性材料[22]。高粱组Ⅲ WRKY基因信息来自参考文献[19],基因序列下载自Phytozome(https://phytozome.jgi.doe.gov/pz/portal.html)。

主要试剂:TransZol Plant植物总RNA纯化试剂盒、Trans2K® Plus DNA Marker、TransStart® Top Green qPCR SuperMix,购自北京全式金生物技术有限公司;ThermoScientific反转录试剂盒K1622,购自Thermo Fermentas公司。

1.2 试验方法

1.2.1 干旱胁迫处理 供试高粱种子用1%(W/ W)NaClO溶液浸泡10 min,然后用灭菌的蒸馏水冲洗干净,采用0.5×Hoagland营养液水培,植株在植物光照培养箱中培养,生长条件为28 ℃、12 h光照、12 h黑暗,光照强度为9 600 lx。营养液每2 d更换1次,待植株生长至3叶期,用含20%(W/W)PEG6000的营养液水培,模拟干旱胁迫处理,于处理后0、1、3、6、12 h收集整株植物,每个样本混合6株植物,每个时间点取3个生物学重复样本。

1.2.2 SbWRKY基因的表达谱分析 从NCBI数据库(https://www.ncbi.nlm.nih.gov)下载有关干旱胁迫的高粱28K芯片表达数据(GSE48205),利用GeneSpring GX 11.5软件(安捷伦科技有限公司)进行分析,获得探针的相对表达倍数,计算log2(fold change)值,然后根据探针对应的基因编号,整理基因的相对表达值。

1.2.3 总RNA提取、cDNA合成及荧光定量表达分析 采用植物总RNA纯化试剂盒提取植株总RNA,对总RNA用1.5% 琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性;以总RNA为模板,使用反转录试剂盒获得cDNA,所用Marker为Trans2K® Plus DNA Marker。以cDNA为模板使用qRT-PCR Mix按照操作说明配制反应体系,在LightCycler480 Ⅱ实时荧光定量PCR仪上进行反应,内参基因选用高粱GAPDH基因。PCR反应体系(10 μL):cDNA 1 μL,2×Mix 5 μL,上游引物、下游引物(表 1)各0.25 μL,补ddH2O至10 μL;PCR扩增程序:95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s,60 ℃ 35 s,35个循环。

表 1 高粱组Ⅲ WRKY基因的qRT-PCR扩增所用引物序列 Table 1 Primer sequences for qRT-PCR amplification of Group Ⅲ WRKY genes of sorghum

1.2.4 qRT-PCR结果统计分析 按照2-Δ ΔCT法计算基因相对表达值[23]。使用EXCEL的student’s T检验进行差异显著性分析。

2 结果与分析 2.1 总RNA完整性检测

为保证反转录和qRT-PCR试验顺利开展,本研究对提取的15个总RNA样本进行琼脂糖凝胶电泳检测,其完整性较好(图 1),可用于后续试验。

图 1 15个RNA样本的琼脂糖凝胶电泳检测 Fig. 1 Detection of 15 RNA samples by agarose gel electrophoresis Trans2KR Plus DNA Marker;16~18:0 h样本;19~21:1 h样本;22~24:3 h样本;25~27:6 h样本;28~30:12 h样本 Trans2KR Plus DNA Marker, 16-18: 0 h samples, 19-21: 1 h samples, 22-24: 3 h samples, 25-27: 6 h samples, 28-30: 12 h samples

2.2 SbWRKY的基因芯片分析结果

为研究高粱响应干旱胁迫的表达特征,从NCBI数据库下载的高粱28K芯片(GSE48205)包含对照、干旱胁迫、热胁迫和复合胁迫(干旱胁迫和热胁迫共同处理)共4组表达值,将表达值导入GeneSpring GX 11.5软件,经数据过滤、标准化处理、重要性分析和差异分析等流程,最后筛选得到4个组Ⅲ SbWRKY基因的差异表达倍数值(表 2)。由结果可知,SbWRKY14SbWRKY32下调表达;SbWRKY39在干旱、热胁迫时下调表达,但在复合胁迫时上调表达;SbWRKY41在3种胁迫处理时均上调表达。

表 2 不同非生物胁迫下高粱SbWRKY基因表达值 Table 2 Expression values of SbWRKYs in sorghum under different abiotic stresses

2.3 SbWRKY基因的qRT-PCR分析结果

为研究组Ⅲ SbWRKY基因响应干旱胁迫的表达谱,采用PEG6000模拟干旱胁迫于不同时间点取样,通过qRT-PCR分析基因处理与对照之间的相对表达值,在16个组Ⅲ成员中成功获得了12个基因的表达谱(图 2);各基因在干旱胁迫处理后不同时间点与对照(0 h)相比,SbWRKY10在处理后3、6 h下调表达,而在处理后12 h上调表达;SbWRKY14在处理后1、6、12 h下调表达;SbWRKY16SbWRKY38SbWRKY41SbWRKY42在处理后1、3、6、12 h均下调表达;SbWRKY17在处理后1、6、12 h下调表达;SbWRKY39SbWRKY89在处理后1、3、12 h下调表达;SbWRKY53在处理后1、12 h下调表达,而在6 h上调表达;SbWRKY75在处理后1 h下调表达,而在3、6、12 h上调表达;SbWRKY93在处理后6 h上调表达。

图 2 干旱胁迫下12个SbWRKY基因的表达谱 Fig. 2 Expression profiles of 12 SbWRKY genes under drought stress

3 讨论

WRKY转录因子在响应各种非生物胁迫方面已有相关报道,WRKY转录因子在植物对干旱胁迫的响应中起重要作用[24]。在拟南芥中过表达TaWRKY1TaWRKY33激活了几个与逆境相关的下游基因,提高了拟南芥在各种胁迫下的萌发率,促进了根系的生长[25]。在烟草和梨中过表达PbrWRKY53增强了对干旱胁迫的耐受性。与野生型相比,转基因植株的活性氧生成相对更少、抗氧化酶活性和代谢产物更高。此外,在转基因烟草中过量表达PbrWRKY53导致PbrNCED1的表达水平提高;敲除PbrWRKY53可下调PbrNCED1的表达丰度,同时降低其耐旱性[26]。水稻组Ⅲ WRKY转录因子OsWRKY11在干旱和高温胁迫时诱导表达,以热激蛋白HSP101基因作启动子驱动OsWRKY11表达时,转基因植株耐热性和耐旱性增强,叶片萎蔫变慢,离体叶片失水较慢;结果表明OsWRKY11基因在应对高温和干旱胁迫反应中起重要作用,可能有助于提高植物的抗逆性[27]

为了解SbWRKY基因在干旱胁迫调控中所起作用,本研究利用公共数据库基因芯片表达谱数据,分析高粱组Ⅲ WRKY基因在干旱胁迫、热胁迫和复合胁迫条件下的表达模式,2个基因(SbWRKY14SbWRKY32)在3种处理条件下均下调表达,1个基因(SbWRKY41)在3种处理条件下上调表达。基因的表达趋势通常反映其相应的功能,在雷蒙德棉中,干旱胁迫处理后,有16个基因(其中包含3个组Ⅲ成员)诱导表达,15个基因表达量减少[28];本研究通过qRTPCR技术检测出12个基因的表达谱,其中4个基因(SbWRKY10SbWRKY53SbWRKY75SbWRKY93)在1个或多个时间点诱导表达,而4个基因(SbWRKY16SbWRKY38SbWRKY41SbWRKY42)在所有时间点均抑制表达。这些结果表明,不同的SbWRKY基因在应对干旱胁迫时可能起不同的调控作用。SbWRKY41的qRT-PCR检测结果与基因芯片检测的表达谱呈相反表达趋势,可能是由于两个研究采用的材料、干旱处理方法不同所致:本研究所用试材为BTx623,以20% PEG6000模拟干旱胁迫;而芯片试验所用试材为R16,采用自然干旱胁迫处理[29]

此外,WRKY转录因子广泛参与了植物生长发育、各种生物及非生物胁迫进程,如在水稻中已验证了16个OsWRKY转录因子的功能,结果表现为Ⅰ类参与抗病进程,Ⅱ b类具有抗病和抗逆功能,Ⅱ d类调控植物的营养生长,而Ⅲ类具有调控营养生长和抗逆等功能[30]。本研究只开展了Ⅲ类基因在干旱胁迫条件下的表达谱分析,这些成员还可能响应低温、高温和高盐等胁迫反应并发挥一定作用。为深入了解这些基因的功能,后续还需克隆这些基因,通过转基因实验验证其生物学功能。

4 结论

高粱WRKY转录因子基因在应对逆境胁迫中起重要调控作用,本研究在前人研究基础上挑选16个高粱组Ⅲ WRKY转录因子基因开展进一步研究。通过基因芯片分析结果表明,SbWRKY14SbWRKY32在3种处理条件下全部下调表达,表明这2个WRKY基因在干旱胁迫、热胁迫和复合胁迫下具有相似功能;SbWRKY41在3种胁迫条件下诱导表达。为进一步分析该组成员的表达谱,以20% PEG6000模拟干旱胁迫,在0、1、3、6、12 h取样,采用qRT-PCR检测出该组12个基因的表达谱;SbWRKY10SbWRKY53SbWRKY75SbWRKY93在1个或多个时间点诱导表达,而SbWRKY16SbWRKY38SbWRKY41SbWRKY42在所有时间点均抑制表达。通过这两种分析方法,筛选到诱导和抑制表达基因,这为我们今后深入了解SbWRKY基因在干旱胁迫中的调控功能提供参考,也为我们克隆耐旱相关基因提供候选基因。

参考文献(References):
[1]
王芳, 高秋, 王杰, 马金星, 孙娟. 利用SSR标记分析高粱属种质资源的遗传多样性[J]. 草业学报, 2016, 25(5): 125-133.
WANG F, GAO Q, WANG J, MA J X, SUN J. Analysis of genetic diversity in sorghum germplasm collections using SSR markers[J]. Acta Prataculturae Sinica, 2016, 25(5): 125-133.
[2]
DUAN Y H, ZOU J Q, LU F. Drought resistance mechanism of sorghum and ensuring seedling technique[J]. Rain Fed Crops, 2009, 29(1): 25-27.
[3]
YANG Z R, WANG X C, LI X M. Advance on the study of transcription fators in higher plants[J]. Hereditas(Beijing), 2004, 26(3): 403-408. DOI:10.1088/1009-0630/6/5/011
[4]
LI K, ZOU C J. Research Progress in WRKY transcription factors in plants[J]. Plant Physiology Journal, 2014, 50(9): 1329-1335.
[5]
ISHIGURO S, NAKAMURA K. Characterization of a cDNA encoding a novel DNA-binding protein, SPF1, that recognizes SP8 sequences in the 5'upstream regions of genes coding for sporamin and β-amylase from sweet potato[J]. Molecular Genetics and Genomics, 1994, 244(6): 563-571. DOI:10.1007/BF00282746
[6]
蒋礼玲, 陈丽华, 尼玛扎西, 马晓岗, 黄胜雄, 李高原. 基于转录组测序数据的青稞WRKY基因家族的生物信息学分析[J/OL]. 分子植物育种, 2020. https://kns.cnki.net/kcms/detail/46.1068.S.20200814.1346.004.html.2020-08-14.
JIANG L L, CHEN L H, NI M Z X, MA X G, HUANG S X, LI G Y. Bioinformatics analyses of WRKY family members in Hordeum vulgare L. var. nudum based on RNA-seq data[J]. Molecular Plant Breeding, 2020. https://kns.cnki.net/kcms/detail/46.1068.S.20200814.1346.004.html.2020-08-14.
[7]
付春, 唐雪, 杨瑶君, 江纳. 中粒咖啡W R K Y基因家族的生物信息学分析[J/OL]. 广西植物, 2020. https://knscnki.net/kcms/detail/45.1134.Q.20200622.1515.002.html.2020-06-23. DOI:10.11931/guihaia.gxzw202003075.
FU C, TANG X, YANG Y J, JIANG N. Bioinformatics analysis of WRKY gene family in Coffee canephora[J/OL]. Guihaia, 2020. https://kns.cnki.net/kcms/detail/45.1134.Q.20200622.1515.002.html. 2020-06-23.DOI:10.11931/guihaia.gxzw202003075.
[8]
毛成志, 王蕾, 孔豆豆, 王寒冬, 张怀刚, 沈裕虎, 徐金青. 大麦全基因组WRKY基因家族生物信息学分析[J]. 分子植物育种, 2019, 17(23): 7623-7633. DOI:10.13271/j.mpb.017.007623
MAO C Z, WANG L, KONG D D, WANG H D, ZHANG H G, SHEN Y H, XU J Q. Bioinformatics analysis of WRKY gene family in barley genome[J]. Molecular Plant Breeding, 2019, 17(23): 7623-7633. DOI:10.13271/j.mpb.017.007623
[9]
周静, 曾玫艳, 安新民. 杨树WRKY基因家族鉴定及其干旱胁迫响应模式分析[J]. 中国细胞生物学学报, 2019, 41(11): 2160-2173. DOI:10.11844/cjcb.2019.11.0012.cjcb.2019.11.0012
ZHOU J, ZENG M Y, AN X M. Identification of Populus trichocarpa WRKY gene family and its' response to drought stress[J]. Chinese Journal of Cell Biology, 2019, 41(11): 2160-2173. DOI:10.11844/cjcb.2019.11.0012.cjcb.2019.11.0012
[10]
AGARWAL P, REDDY M P, CHIKARA J. WRKY: its structure, evolutionary relationship, DNA-binding selectivity, role in stress tolerance and development of plants[J]. Molecular Biology Reports, 2011, 38(6): 3883-3896. DOI:10.1007/s11033-010-0504-5
[11]
ZHANG L P, CHEN L G, YU D Q. Transcription factor WRKY75 interacts with DELLA proteins to affect f lowering[J]. Plant Physiology, 2018, 176(1): 790-803. DOI:10.1104/pp.17.00657
[12]
DUAN S W, WANG J J, GAO C H, JIN C Y, LI D, PENG D S, DU G M, LI Y Q, CHEN M X. Functional characterization of a heterologously expressed Brassica napus WRKY41-1 transcription factor in regulating anthocyanin biosynthesis in Arabidopsis thaliana[J]. Plant Science, 2018, 268: 47-53. DOI:10.1016/j.plantsci.2017.12.010
[13]
GU L J, Dou L L, Guo Y N, Wang H T, Li L B, Wang C C, Ma L, Wei H L, Yu S X. The WRKY transcription factor GhWRKY27 coordinates the senescence regulatory pathway in upland cotton(Gossypium hirsutum L. )[J]. BMC Plant Biology, 2019, 19(1): 116. DOI:10.1186/s12870-019-1688-z
[14]
决登伟, 桑雪莲, 舒波, 刘丽琴, 王一承, 石胜友. 玉米WRKY转录因子非生物胁迫的表达分析[J]. 广东农业科学, 2017, 44(1): 15-22. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2017.01.003
JUE D W, SANG X L, SU B, LIU L Q, WANG Y C, SHI S Y. Expression analysis of maize WRKY transcription factor genes under abiotic stress[J]. Guangdong Agricultural Sciences, 2017, 44(1): 15-22. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2017.01.003
[15]
张惠媛, 刘永伟, 杨军峰, 张双喜, 于太飞, 陈隽, 陈明, 周永斌, 马有志, 徐兆师, 付金东. 小麦转录因子基因TaWRKY33的耐盐性分析[J]. 中国农业科学, 2018, 51(24): 4591-4602. DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.001
ZHANG H Y, LIU Y W, YANG J F, ZHANG S X, YU T F, CHEN J, CHEN M, ZHOU Y B, MA Y Z, XU Z S, FU J D. Identification and analysis of salt tolerance of wheat transcription factor TaWRKY33 protein[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2018, 51(24): 4591-4602. DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.001
[16]
万庆. 甜高粱中SSWRKY28、SSWRKY76基因的克隆和功能分析[D]. 开封: 河南大学, 2018.
WAN Q. Cloning and Expression analysis of SSWRKY28 and SSWRKY76 genes in Sorghum dochna[D]. KAIFENG: Henan University, 2018.
[17]
YANG Z, CHI X Y, GUO F F, JIN X Y, SUN B. SbWRKY30 enhances the drought tolerance of plants and regulates a drought stress-responsive gene, SbRD19, in sorghum[J]. Journal of Plant Physiology, 2020(246/247): 246-247. DOI:10.1016/j.jplph.2020.153142
[18]
DOU L L, GUO Y N, ONDATI E, PANG C Y, WEI H L, SONG M Z, FAN S L. Identification and expression analysis of group Ⅲ WRKY transcription factors in cotton[J]. Journal of Integrative Agriculture, 2016, 15(11): 2469-2480. DOI:10.1016/S2095-3119(15)61306-5
[19]
赵兴奎, 范昕琦, 聂萌恩, 王海燕, 柳青山, 段永红. 高粱WRKY家族成员鉴定及生物信息学分析[J]. 分子植物育种, 2020, 18. DOI:10.13271/j.mpb.018.004170
ZHAO X K, FAN X Q, NIE M A, WANG H Y, LIU Q S, DUAN Y H. Identification and bioinformatics analysis of WRKY family in sorghum[J]. Molecular Plant Breeding, 2020(13): 18-4181. DOI:10.13271/j.mpb.018.004170
[20]
高雪, 尼玛扎西, 刘国一, 谭海运. PEG模拟干旱胁迫对白菜型春油菜芽期生长特性的影响[J]. 广东农业科学, 2020, 47(7): 9-17. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2020.07.002
GAO X, NI M Z X, LIU G Y, TAN H Y. Effects of PEG simulation drought stress on growth characteristics of spring rapeseed(Brassica campestris L.)at bud stage[J]. Guangdong Agricultural Sciences, 2020, 47(7): 9-17. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2020.07.002
[21]
袁玉婷. PEG模拟干旱胁迫西藏甘蓝型春油菜芽期根系特征及抗旱性研究[J]. 广东农业科学, 2020, 47(7): 18-25. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2020.07.003
YUAN Y T. Root characteristics and drought resistance of Tibetan spring rapeseed(Brassica napus L.)at bud stage under PEG simulation drought stress[J]. Guangdong Agricultural Sciences, 2020, 47(7): 18-25. DOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2020.07.003
[22]
MAHESHWARI P, MUMMARI D, PALAKOLANU S R, TEJASWI U N, NAGARAJU M, RAJASHEKER G, JAWAHAR G, JALAJA N, RATHNAGIRI P, KISHORID P B K. Genome-wide identification and expression profile analysis of nuclear factor Y family genes in Sorghum bicolor L.(Moench)[J]. PLOS ONE, 2019, 14(9): e0222203. DOI:10.1371/journal.pone.0222203
[23]
PFAFFL M W. A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR[J]. Nucleic Acids Research, 2001, 29(9): e45. DOI:10.1093/nar/29.9.e45
[24]
GUO Y, PING W J, CHEN J T, ZHU L Y, HUANG Y Q. Meta-analysis of the effects of overexpression of WRKY transcription factors on plant responses to drought stress[J]. BMC Genetics, 2019, 20(1): 1-14. DOI:10.1186/s12863-019-0766-4
[25]
HE G H, XU J Y, WANG Y X, LIU J M, LI P S, CHEN M, MA Y Z, XU Z S. Drought-responsive WRKY transcription factor genes TaWRKY1 and TaWRKY33 from wheat confer drought and /or heat resistance in Arabidopsis[J]. BMC Plant Biology, 2016, 16(1): 116-131. DOI:10.1186/s12870-016-0806-4
[26]
LIU Y, YANG T Y, LIN Z K, GU B J, XI NG, C H, ZHAO L Y, DONG H Z, GAO J Z, XIE Z H, ZHANG S L, HUANG X S. A WRKY transcription factor PbrWRKY53 from Pyrus betulaefolia is involved in drought tolerance and As accumulation[J]. Plant Biotechnology Journal, 2019, 17(9): 1770-1787. DOI:10.1111/pbi.13099
[27]
WU X L, SHIROTO Y, KISHITANI S, ITO Y, TORIYAMA K. Enhanced heat and drought tolerance in transgenic rice seedlings overexpressing OsWRKY11 under the control of HSP101 promoter[J]. Plant Cell Reports, 2009, 28(1): 21-30. DOI:10.1007/s00299-008-0614-x
[28]
CAI C P, NIU E L, DU H, ZHAO L, FENG Y, GUO W Z. Genome-wide analysis of the WRKY transcription factor gene family in Gossypium raimondii and the expression of orthologs in cultivated tetraploid cotton[J]. The Crop Journal, 2014, 2(2/3): 87-101. DOI:10.1016/j.cj.2014.03.001
[29]
JOHNSON SM, LIM F L, FINKLER A, FROMM H, SLABAS A R, KNIGHT M R. Transcriptomic analysis of Sorghum bicolor responding to combined heat and drought stress[J]. BMC Genomics, 2014, 15: 456. DOI:10.1186/1471-2164-15-456
[30]
郑超, 郑二松, 王栩鸣, 李冬月, 杨勇, 余初浪, 周洁, 严成其, 陈剑平. 水稻WRKY转录调控因子研究进展[J]. 生物技术通报, 2018, 29(2): 286-294. DOI:10.3969/j.issn.1009-0002.2018.02.026
ZHENG C, ZHENG E S, WANG X M, LI D Y, YANG Y, YU C L, ZHOU J, YAN C Q, CHEN J P. Research progress on rice WRKY transcription factors[J]. Letters in Biotechnology, 2018, 29(2): 286-294. DOI:10.3969/j.issn.1009-0002.2018.02.026
(责任编辑  崔建勋)